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顺式测验 反式测验 突变位点 在同一顺 反子内 A B + － A B 突变位点 在不同的 顺反子内 + A B + A B 图 顺反测验结果的图解。当顺式有功能，而反式没有功能时，突变 位点 突变位点在同一顺反子内； 当顺式有功能，而反式也有功能时，突变 位点 突变位点在不同顺反子内。 第31页/共35页 Cis/Trans Complementation Test 第32页/共35页 Cis/Trans Complementation Test 第33页/共35页 3、果蝇中的顺反实验 Cis/Trans Complementation Test 第34页/共35页 五、近代基因概念的发展 第35页/共35页 一、基因和DNA 1、测序： （1）、化学降解法 美国A.Maxam 和W.Gilbert发明 第1页/共35页 标记 32P-TCAG 32P-TCAGCCCCATG 32P-TCAGCCCCATGG 32P-TCAGCCCCATGGTTAAG T处断裂 TCAGCCCCATGGTTAAGA-------单链DNA 32P-TCAGCCCCATGGTTAAGA 32P-T 32P-TCAGCCCCAT 32P-TCAGCCCCATGGT 32P-TCAGCCCCATGGTT 32P-TC 32P-TCAGC 32P-TCAGCC 32P-TCAGCCC 32P-TCAGCCCC 32P-TCAGCCCC 32P-TCA 32P-TCAGCCCCA 32P-TCAGCCCCATGGTTA 32P-TCAGCCCCATGGTTAA 32P-TCAGCCCCATGGTTAAGA A处断裂 C处断裂 G处断裂 第2页/共35页 T C A G 电泳 放射自显影 第3页/共35页 （2）双脱氧终止法（链终止法） （英）F.Sanger 和A.X .Coulson发明 C C C H CH O 四种碱基 H H H H -O-P-O-P-O-P-O-CH2 O- O- O- O O O 双脱氧核苷酸 第4页/共35页 DNA sequencing using the chain termination method. 第5页/共35页 DNA sequencing gel showing the separation of fragments in the four sequencing reactions (one per lane). 第6页/共35页 In DNA sequencing using dideoxynucleotides labeled with fluorescent dyes, all four ddNTPs are added to the same tube, and during primer extension, all combinations of chains are produced. 第7页/共35页 2、隔裂基因和重叠基因 　　 (1)、隔裂基因（split gene） 内含子(intron)　 外显子(exon) (2)重叠基因（overlapping genes） 1977, Sanger: ΦX174测序 ABCABCABCABCABCABCABC ……... 基因基本特性：①自体催化 　　　　　　　　　②异体催化 　　　　　　　　　 ③ 突变 通读框（open reading frame） 第8页/共35页 二、生化突变型与一基因一酶学说 1941 ，Beadle Tatum 提出： “ one gene one enzyme” hypothesis ↓ ↓ ↓