基因文库及复习.pptVIP

第1页/共18页 基因文库 基因组文库 第2页/共18页 第3页/共18页 第4页/共18页 第5页/共18页 利用PCR技术扩增目的基因 条件： 已知目的基因的核苷酸序列 先加热至90－95度后降温至55－56度 结果：指数式增加 第6页/共18页 2基因表达载体的构建－－基因工程的核心 基因表达载体 启动子： 终止子： 目的基因 标记基因 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时能够表达和发挥作用 第7页/共18页 一段特殊结构的DNA片断，RNA聚合酶识别和结合的位点；使转录开始 启动子： 终止子： 一段特殊结构的DNA片断，使转录停止 将生物所有DNA直接导入受体细胞不是更简单吗？如果这么做，结果会怎样？ 第8页/共18页 3、将目的基因导入受体细胞 目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程， 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 第9页/共18页 将目的基因导入植物细胞－双子叶植物 农杆菌转化法 第10页/共18页 将目的基因导入植物细胞－单子叶植物 基因枪法 第11页/共18页 将目的基因导入植物细胞－花粉管通道法 第12页/共18页 将目的基因导入动物细胞 显微注射 将目的基因导入微生物细胞 常用的为大肠杆菌， 用CaCl2处理 感受态细胞 重组载体与之混合 第13页/共18页 将目的基因导入微生物细胞 常用的为大肠杆菌， 用CaCl2处理 感受态细胞 重组载体与之混合 第14页/共18页 4、目的基因的检测和鉴定 －－检查基因工程是否成功的一步 A、转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因－DNA分子杂交法 B、目的基因是否转录出mRNA－分子杂交法 C、目的基因是否翻译成蛋白质－抗原抗体杂交 个体生物学水平鉴定 第15页/共18页 第16页/共18页 如何从基因文库中找到所需要的基因 根据目的基因的有关信息 基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质 第17页/共18页 作为基因工程表达载体，只需目的基因就可以完成任务吗？ 根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出不能导入单子叶植物的原因吗？ 大肠杆菌可以生产人的胰岛素，联系以前知识，结合基因工程，若要生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌吗？ 第18页/共18页