rarα和nlsrarα蛋白的细胞生物学功能分析及其作为转录因子的实验研究-cellular biological function analysis of rar α and nls rar α proteins and their experimental study as transcription factors.docxVIP

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2018-06-01 发布于上海
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rarα和nlsrarα蛋白的细胞生物学功能分析及其作为转录因子的实验研究-cellular biological function analysis of rar α and nls rar α proteins and their experimental study as transcription factors

英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文全称AAdeAbsorbanceadenine吸光度腺嘌呤AGAgarose琼脂糖AmpAmpicillin氨苄青霉素急性早幼粒细胞APLacute promyelocytic leukemia白血病ATRAAll trans retinoic acid全反式维甲酸bpbase pair碱基对BSAAlbumin from bovine serum牛血清白蛋白CDSCoding sequence编码序列区CO2carbon dioxide二氧化碳CCK-8cell counting kit-8CCK-8 试剂盒℃centigrade摄氏度DAPI4,6-diamidino-2-phenylindole4,6-二脒基-2-苯基吲哚ddH2ODouble-distilled water双蒸水DEPCDiethypyrocarbonate焦炭酸二乙酯DMSODimethyl Sulfoxide二甲基亚砜DMEMDulbecco′s modified Eagle′s medium改良Eagle/Ham培养基DNADeoxyribonucleic acid脱氧核糖核酸EBethidium bromide溴化乙锭EDTAethylenediaminetetraacetic acid乙二胺四乙酸EMSAElectrophoresis mobility shift assay凝胶电泳迁移率ggram克1hhour(s)小时HRPHorseradish Peroxidase辣根过氧化物酶IgGImmunoglobulin G免疫球蛋白 GKDkilodalton千道尔顿KanKanamycin卡那霉素LLiter公升LBLuria-Bertani CultureLB 培养基mgMilligram毫克ngnanogram纳克μgmicrogram微克mlmilliliter毫升μlmicroliter微升molmole摩尔μmolmicromole微摩尔nmolmillimole纳摩尔急性早幼粒细胞NB4Acute Promyelocytic LeukemiaNENeutrophil Elastase白血病细胞株中性粒细胞弹性蛋白酶NLSNuclear localization signal核定位信号ODoptical density光密度PBSPhosphate Buffered Saline磷酸盐缓冲液PCRPolymerase Chain Reaction多聚酶链式反应PMSFPhenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟PVDFPoly vinylidene fluoride聚二氟乙烯RARαretinoic acid receptor α维甲酸受体 αRXRαrexinoic receptor α视黄醛受体 αRNARibonucleic Acid核糖核酸2r/minround per minute转/分SDSsodium dodecyl sulfate十二磺基硫酸钠耐热 DNA 聚合TaqThermos Aquaticus DNA Polymerase酶TBSTTris-Buffered Saline Tween-20三羟甲基氨基甲烷吐温-20 缓冲盐水TETris/EDTA bufferTris-EDTA 缓冲液TrisTris(Hydroxymethyl)aminomethane三（羟甲基）氨基甲烷TrizolTotal RNA Isolation总 RNA 提取试剂3RARα 和 NLS-RARα 蛋白的细胞生物学功能分析及其作为转录因子的实验研究摘要第一部分携带RARα基因的重组腺病毒表达质粒的构建及其对人白血病细胞的影响目的：用AdEasy系统构建人RARα基因重组腺病毒表达质粒, 感染人白血病细胞株NB4后用一定浓度的全反式维甲酸ATRA诱导, 观察其对白血病细胞株增殖、分化和凋亡的影响，同时与变异型 NLS-RARα的细胞生物学功能相比较，观察二者的生物学功能差异。方法：以白血病细胞株NB4的cDNA为模板，PCR扩增RARα基因，克隆至穿梭质粒 pAdTrace-TO4 中, 构建重组腺病毒穿梭质粒 pAdTrace-TO4-RARα。用限制性内切酶EcoR V和Sal I双酶切及测序鉴定，然后转化含有骨架质粒AdEasy-1的大肠杆菌BJ5183菌株的感受态，同源重组获得重组腺病毒质粒Ad-RARα。酶切验证后，限制性内切酶Pac I酶线性化后转染 HEK293细胞，包装出重组腺病毒 Ad-RARα，经3轮扩增后，测定病毒滴度，进行PCR鉴定。流式细胞术测定病毒感染效率，Western blot