reck和mmp9在喉鳞癌中的表达及相关性分析-expression and correlation analysis of reck and m mp9 in laryngeal squamous cell carcinoma.docxVIP

英文缩写词表英文缩写英文全称中文全称RECKrevemion-inducing-cysteine-richprotein with kazal motifs伴有 kazal 域的富含半胱氨酸的逆转 诱导蛋白MMP-9matrix metalloproteinase-9基质金属蛋白酶-9RT-PCRreversetranscriptasepolymerasechain reaction逆转录聚合酶链反应LSCClaryngeal squamous cell carcinoma喉鳞状细胞癌ECMextra cellular matrix细胞外基质DABdimethylaminoazobenzene二氨基联苯胺DEPCdiethypyrocarbonate焦碳酸二乙酯RNAribonucleic acid核糖核酸cDNADeoxyribonucleic acid脱氧核糖核酸EBEthidium bromide溴化乙锭学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文 中任何引用他人的成果，均己做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意 义上己属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人己用于其他学位申请的论 文或成果。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确 的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果 :1、交囚学校授予的学位证书;2 、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报:3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害， 进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:材吟日期: 如|年_t_JJ _lj_ R学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留 或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅: 本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名: 指导教师签名:日期: 2e l1年L月2上日 日期:1 [f年b 月z.._日(本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可 ，任何单位及任何个人不得擅自使用前言喉癌在我国 常见的头颈部恶性肿瘤，近年来发病率有明显增加的趋势，其 中96%---98%为鳞状细胞癌【1】。 恶性肿瘤的重要特征是侵袭与转移，而肿瘤细胞穿透基底膜是最核心的一个环节，此过程中基质金属蛋白酶(matrixmetallo- Proteinases，MMPs)是最主要的一组酶类，它能够降 解细胞外基质(extra cellular matrix ECM)从而形成肿瘤侵袭与转移的通道【2】。RECK基因是 近年来发现的新型MMPs抑制因子。当前认为至少可以抑制3种MMPs的表达，即MMP-2、 MMP-9及MMP-14【3】。其中MMP-2和MMP-9与肿瘤的关系尤其密切，二者都可降解构成ECM 的重要成分——IV型胶原蛋白。有研究表明，在头颈肿瘤中MMP-9与肿瘤促进因子相关， 如p53突变、微血管高密度、No合成酶的激活、cGMP的高水平等。这些提示与MMP-2相比， MMP-9在头颈肿瘤的侵袭、转移中可能扮演更为重要的角色【4】。因此，RECK和MMP-9的 相互调节在头颈肿瘤的生长、侵袭中起重要作用。本研究采用RT-PCR法及免疫组化SP法检 测RECK及MMP-9在喉鳞状细胞癌及其癌旁不同距离组织中的表达情况，探讨二者在喉鳞 癌中的表达情况及在临床的意义。1.研究对象材料与方法所选病例为2009年01月--2010年09月山西医科大学第一医院病历资料完整确诊为喉鳞 癌患者38例,术前未行放、化疗。男36例,女2例;年龄为40-78岁,平均年龄63.8岁。病理报 告中高分化7例,中分化18例,低分化13例。声门区癌17例,声门上区癌19例,声门下区癌2例。 TNM按UICC2002年修订标准:I期7例,II期13例,III期8例,IV期10例。有淋巴转移者26例，无 淋巴转移者12例。2. 取材将肿瘤整体切除后，沿肿瘤长轴切取矩形标本块，该标本一端为肿瘤组织，另一端为 肉眼所见正常组织。将所取标本切为癌组织、距癌边缘 0.2cm(0.2-0.3cm)、0.5cm(0.4-0.5cm) 和 1.0cm(0.6-1.0cm)四块组织，每块切为两部分，一部分立即用于总 RNA 提取。另一部分以 10%中性甲醛固定 24 小时后石蜡包埋，切片 5μm 片，行 HE 染色（图 3-6）及免疫 组化染色。取不到 1