电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑微血管结构影响.pdfVIP

塑苎!堕堂堕!!塑堑堡主里壅竺 竺兰竺笙苎 前言 脑血管疾病(又称卒中)是严重威胁人类健康的三大疾病之一，其中又以缺 血性脑病(缺血性脑卒中)最为多见。其高发病率、高致残率，高复发率、高死 亡率的特点，给个人、家庭和社会带来沉重的负担。随着社会老龄化进程的加快， 脑血管疾病的发病率在逐年增加。有资料显示，我国脑血管疾病的死亡率已占世 界各国的第七位，而幸存者中约有3／4不同程度丧失劳动能力，重度致残率达40 ％以上，其中缺血性脑病又占其中的60％一70％。故对其发病机制、临床诊断及 治疗的研究仍是世界各国重点攻关的课题之一。 目前西医对缺血性脑病急性期的临床治疗原则是溶栓、抗凝、降纤、抗血小 板聚集以及脑保护治疗等，其主要目的是恢复缺血区的血供。恢复缺血部位的血 供确实是治疗脑缺血疾病的一个关键所在，但是缺血再灌也有可能导致脑徽血管 损害，出现血管源性脑出血、脑水肿，加重脑损害。目前有关再灌注后脑微血管 损害特征及机制尚不清楚。一些研究者们在局灶脑缺血大鼠模型中发现再灌注后 血脑屏障损伤，伊凡斯蓝漏入脑组织，认为可能是再灌注后脑徽血管内皮细胞紧 密连接开放引起“1。然而，也有研究认为局部脑缺血再灌注后脑微血管以内皮细 胞脱落，基底膜破坏为主“’。尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活物(urokinase—type plasminogenactivator，uPA)是细胞外问质和基底膜降解的主要酶类，脑缺血 再灌时，可以破坏微血管结构的完整性。纤溶酶原激活物抑制剂(p18sminogen activator 细胞表面和微血管基底膜免受蛋白分解酶的降解：保护细胞间的接触面而保持组 织结构的完整性。因此，在脑缺血再灌时，观察uPA、PAI的表达，对进一步阐 明缺血性脑损伤的机制有着重要的意义。 针灸治疗作为一种有效的疗法，在治疗脑血管疾病方面积累了丰富的经验， 具有很高的临床应用价值。临床和实验研究也证明了针剌督脉穴为主能有效地改 善中风的临床症状和体征o。1。缺血性脑卒中归属中医“中风”的范畴。中医学 认为中风病的基本病机是本虚标实，病位在脑，与心、肝、肾三脏阴阳失调密切 相关，其病机关键为气血并逆、气虚血瘀、瘀阻脑络。因此，本课题本着“补气 活血、通络开窍”的原则，针刺“大椎”“内关”两穴，观察针刺后对脑缺血再 灌注大鼠uPA、PAl表达的影响，为针灸抗脑缺血再灌注损伤提供理论依据，进 而能指导临床应用。 毕业论文 实验研究 1材料与方法 1．1实验材料 1．1．1实验动物 清洁级健康sD大鼠40基，雌雄不限，体重为200士209，由湖北中医学院实 验动物中心提供。于实验前一周一次性购进，饲养于安静、温暖且避强光的环境 中，室温22士2℃，自由饮水饮食。 1．1．2主要实验用品 (1)uPA、PAI—l免疫组化试剂盒(购于武汉博士德) (2)多聚甲醛(德国E·merk公司产品) (3)l 0％水台氯醛 (4)O．01MPBs缓冲液 (5)O．9％生理盐水 1．1．3主要实验器械 (1)电热烧灼器 (2)日产01ympus光学显微镜 (3)石蜡切片机 (4)l{PIAs一2000型全自动彩色图像分析仪 (5)手术用及其它器械：无菌医用缝合针等 1．2实验方法 1．2．1脑缺血模型制备 1．2．1．1线栓的制备 选择直径为O．26哪一o．28衄单股缝合尼龙线，长60哪，将插入端加热熔化， 使之成为光滑球面，直径约0．30哪，用酒精清洁后置于生理盐水中备用。 1．2．1．2脑缺血再灌模型制备 局灶型脑缺血(McA0)再灌模型的建立采用改良线栓法“1。 腹腔麻醉并保温。麻醉大鼠仰卧固定于手术台上，常规皮肤消毒后，颈部正中切 口，暴露右侧颈总动脉(cc^)，分离出颈内动脉(Ic^)、颈外动脉(EcA)。 电凝EcA入脑分支，结扎游离EcA主干，分离IcA主干至翼膊动脉(PPA)，并 在其起始部位置一动脉夹。先将ccA用动脉夹夹住，再在EcA残端剪O．2mm的小 口，将栓线插入。轻推尼龙线尾端经C“分叉部沿IcA入颅，至大脑中动脉(MCA)， 遏阻即止。尼龙线插入深度约18衄，30分钟后，抽取栓线对大鼠进行脑缺血再