痹祺胶囊组方配伍对细胞色素p450同工酶活性影响.pdfVIP

第一章全新cocktail探针药物组合的建立与方法学确证 的活性，与单独使用一种探针药物相比具有很多优点，如可以降低个体间和个体 内药物代谢酶活性变异的影响，同时还可以缩短分析周期，降低实验费用【21。 1．1．1．2评价药物间是否存在着相互作用 许多药物都要经由P450酶代谢，因此多种药物的同时服用就可能对药物的 代谢产生抑制、活化或者诱导作用。这种药物间的相互作用可能引起严重的不良 反应，尤其是对那些治疗窗狭窄的药物。使用“Cocktajl”探针药物法评价药物在 体内对主要代谢酶的作用，比单独一种探针药物具有明显的优势，因此成为了考 察药物间相互作用一个普遍的筛选工具。一般首先要进行体外实验，如果发现该 药物抑制或诱导主要药物的代谢酶，那么接下来再进行体内实验。如Schellens 等人的研究中使用尼非地平、美芬妥英和司巴丁构成的“Cocktail，，探针组合，结 果发现服用奎尼丁后司巴丁和尼非地平的代谢被明显抑制，推断这种抑制作用主 要是由于药物由共同的药物代谢酶参与而引起的【3】。Shelepova等人采用经过验 证有效的“5+l Cocktajl”(咖啡因，右美沙芬，奥美拉唑，咪达唑仑，华法林和 维生素K)评价口服避孕药对几种药物代谢酶活性的影响，结果发现口服避孕药 用于评价中药是否改变CYP450酶的活性，如使用“Cocktajl”探针药物法评价姜 黄和连翘对肝细胞色素P450酶的影响：采用有咖啡因、氨苯砜和氯唑沙宗组成 的“Cocktail，，探针来测定肝细胞色素P450酶的活性，结果发现姜黄对大鼠 cYPl A2和cYP2El有抑制作用，但对cYP3A4的影响不显著【5】；连翘对大鼠 不显著【6】。因此当这些药物与其有影响的酶的底物药物合用是很可能会发生相互 作用。 1．1．1．3研究药物代谢酶活性与疾病之间的关系 许多疾病状态都可以导致药物代谢酶活性的改变，Liu等人采用氯唑沙宗、 咖啡因、氨苯砜、美芬妥英和异喹胍组成的“Cock谢l，，探针组合进行研究发现： 性则明显降低。30天后CYP2D6的活性仍不能恢复到正常水平r刀。 L1．1．4研究遗传或非遗传因素对药物代谢酶活性的影响 药物代谢酶基因型表型的数据可以通过“Cocktajl”探针药物法获得，基因型可 以通过检测已知的或未知的SNPs(单一的核苷酸多态现象)得到。因此，就可 第一章全新cocktail探针药物组合的建立与方法学确证 以观察基因变异对药物代谢酶功能的影响。研究发现底物识别部位的氨基酸的改 变对代谢酶活性的影响最大，对单合子卵双生和双合子的双胞胎的对照实验还可 以研究其它非遗传因素对药物代谢酶活性的影响。 1．1．1．5验证某些疾病发病机理的假说 “cocktail”探针药物法还可以用于研究某些疾病的发病机制，如对最初氯乙烯 Ⅳ-乙酰转移酶产生的活性中间体可能导致氯乙烯病的假说。为了验证这～假说， 采用了美芬妥英、异喹胍和氨苯砜组成的“Cocktail”，发现没有证据说明CYP2D6、 CYP2C19、CYP3A或者Ⅳ-乙酰转移酶在诱导产生氯乙烯病中发挥作用【引。此外 在检验环境中前致癌物假说中采用“Cocktail”探针药物法还可以明显减少机体接 触危险物质的时间。Branch等就是采用美芬妥英、异喹胍和氨苯砜组成的 “Cocktajl”探针组合对药物多个代谢途径进行研究，从而为膀胱癌的前致癌物环 境假说提供了证据【9】。 1．1．1．6评价肾脏药物清除率路径的改变 肾脏是药物排泄的主要器官，药物在肾脏的清除包括肾小球滤过、肾小管分 泌和肾小管重吸收。传统的评价肾脏功能的指标包括测定血浆中的肌酐，计算肌 酐清除率。然而肌酐清除率的测定只能反映肾小球过滤的情况。很多研究说明， 测定的肌酐清除率和肾脏药物清除率之间的关联性较弱。很多疾病都可以改变肾 脏排泄药物的能力，并且疾病对上述三个过程的影响是不平行的，因此只通过肾 小球过滤能力的改变来调整给药剂量是远远不够的，这就需要重新评价肾脏功能 的标记物。近年来Gross等人应用“Cocktail”标记物(海葱糖、对氨基马尿酸、吲 哚洛尔和氟康唑)可以同时测定肾小球滤过、肾小管分泌和肾小管重吸收三个肾 u，¨J。 脏清除途径的改变11 1．1．2本实验中全新探针药物组合的建立思路 如表1．1所示，一些“Cocktail，，探针药物组合(尤其是五种或六种药物的组 合)被提出并建立起来峪201。在最初的“Cocktail’’中，每一种底物／代谢产物