高中生物课件必修2第6章 从杂交育种到基因工程 第2节 基因工程及其应用.ppt

* * 這段 探針經放射性磷酸標定後，可用在 Southern blotting 上，與未知樣本中的核酸進行雜合反應。目標基因若在細菌中，則必須先把細菌溶解，然後以化學反應使核酸變性露出單股 DNA，則可與探針進行雜合反應。 * 第2节 基因工程及其应用 一 基因工程的原理 基因工程，又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。 1、基因工程的基本工具 （1）基因的“剪刀”：限制性核酸内切酶 G A A T T C C T T A A G ↓ 限制酶 ↓ 1、基因工程的基本工具 （1）基因的“剪刀”：限制性核酸内切酶 G A A T T C C T T A A G ↓ 限制酶 ↓ 切割磷酸二酯键 1、基因工程的基本工具 （1）基因的“剪刀”：限制性核酸内切酶 A A T T C C T T A A G G 氢键自动断裂 1、基因工程的基本工具 （1）基因的“剪刀”：限制性核酸内切酶 A A T T C C T T A A G G (2)基因的针线：DNA连接酶 1、基因工程的基本工具 A A T T C C T T A A G G (2)基因的针线：DNA连接酶 1、基因工程的基本工具 A A T T C C T T A A G G 碱基互补配对 (2)基因的针线：DNA连接酶 1、基因工程的基本工具 A A T T C C T T A A G G DNA连接酶 (2)基因的针线：DNA连接酶 1、基因工程的基本工具 A A T T C C T T A A G G DNA连接酶 (2)基因的针线：DNA连接酶 1、基因工程的基本工具 A A T T C C T T A A G G DNA连接酶 连接磷酸二酯键 限制酶 解旋酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 （3）、基因的运输工具——运载体 常用的运载体： 质粒、 噬菌体、 动植物病毒等 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 标记基因 EcoRI识别序列 含有目的基因的一段DNA序列 2、目的基因提取 目的基因 质粒 取出质粒 用同一种限制酶切割 EcoRⅠ 目的基因 3、目的基因与运载体结合 重组质粒（重组DNA） 4、将目的基因导入受体细胞 5、目的基因的检测 （2）、核酸分子杂交 DNA （1）、利用质粒上的标记基因 目的基因 DNA变性，双链解开 单菌落 溶解 杂交 放射性 32P标记的DNA分子探针 Juang RH (2004) BCbasics 核酸分子杂交的应用 寻找目的基因 基因诊断 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制 酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连 接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 基因工程操作的基本步骤 1、基因工程与作物育种 获得高产、稳产和具有优良品质的农作物； 培育出具有各种抗逆性的作物新品种 如抗虫、耐贮存、抗除草剂 * * 這段 探針經放射性磷酸標定後，可用在 Southern blotting 上，與未知樣本中的核酸進行雜合反應。目標基因若在細菌中，則必須先把細菌溶解，然後以化學反應使核酸變性露出單股 DNA，則可與探針進行雜合反應。 *