新斯的明对经银环蛇毒素处理后的离体大鼠膈肌肌条张力的影响-effect of neostigmine on the tension of isolated rat diaphragm muscle strips treated with cyclophosphamide.docxVIP

新斯的明对经银环蛇毒素处理后的离体大鼠膈肌肌条张力的影响-effect of neostigmine on the tension of isolated rat diaphragm muscle strips treated with cyclophosphamide.docx

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新斯的明对经银环蛇毒素处理后的离体大鼠膈肌肌条张力的影响-effect of neostigmine on the tension of isolated rat diaphragm muscle strips treated with cyclophosphamide

英文缩略词表缩写英文全称中文全称BGTAChAChRAChEnAChRsPLAPLCBungatotoxinAcetylcholineAcetylcholinereceptorAcetylcholinesteraseNicotinicacetylcholinereceptorPhospholipaseAPhospholipaseC银环蛇毒素乙酰胆碱乙酰胆碱受体乙酰胆碱酯酶烟碱型乙酰胆碱受体磷脂酶A磷脂酶CTCTubocurarine筒箭毒碱TOFTrain-of-fourstimulus四个成串刺激O2CO2MEPPOxygenCarbondioxideMicro-end-platepotential氧气二氧化碳微终板电位EPPEndplatepotential终板电位DICDisseminatedintravascularcoagulation弥散性血管内血凝血1新斯的明对经银环蛇毒素处理后的离体大鼠膈肌肌条张力的影响硕士研究生:李燕导师:梁子敬教授中文摘要背景和目的我国每年蛇伤病例约30万例,病死率3-5%。特别是华南地区,毒蛇伤是常见急症之一,其中银环蛇咬伤占各类毒蛇咬伤的8.12%[1,2]。银环蛇毒素以神经毒素为主[3,4,5],干毒包含多种成分,如α-银环蛇毒素、β-银环蛇毒素、κ-银环蛇毒素、P-银环蛇毒素[6,7]等,毒性强,中毒者常因神经肌肉传导阻滞表现为的骨骼肌无力,临床骨骼肌无力症状出现的顺序为先见眼睑下垂、后可有吞咽困难、流涎,继而四肢肌力减弱甚至瘫痪,严重者可因呼吸肌麻痹造成窒息死亡,症状恢复顺序与出现顺序相反。目前国际公认的治疗蛇咬伤的方法是伤口局部处理及尽早使用抗蛇毒血清,严重者影响到呼吸功能时需要机械辅助通气、血液灌流及恢复肌力的药物等治疗。鉴于蛇咬伤常发生在山区、郊外等地,地方医院不能常规配备抗蛇毒血清,使得抗蛇毒血清无法得到普遍推广和应用。故寻求更多的治疗方法即能安全、广泛的使用,又能为蛇咬伤病人争取更多的救治时间是十分必要的。在以往的报道中,新斯的明拮抗银环蛇成分毒素(例如:α-银环蛇毒素、β-银环蛇毒素等)或其他蛇毒神经毒素所致骨骼肌无力的影响尚存争议[8]。又有相关研究表明,新斯的明在拮抗其他因神经肌肉传导阻滞而出现骨骼肌无力的疾病中疗效确切,例如非去极化肌松剂所致的骨骼肌无力[9,10,11]。曾有试验将多种蛇毒神经毒素与非去极化肌松剂(如筒箭毒碱)进行对比[8],多项结果显示其致病机制是及其相似的。而目前有关新斯的明拮抗银环蛇干毒所致骨骼肌无力的影响尚鲜有实验论证。偶有临床报道新斯的明在治疗神经毒素为主的蛇咬伤疾病时可减少呼吸机的2应用[12]。本项研究旨在:通过检测不同浓度新斯的明对经银环蛇毒素处理后的大鼠膈肌肌条张力的改变,明确新斯的明是否可改善骨骼肌肌力。方法将健康SPF级雌性SD大鼠20只,随机分为四组(n=5):正常对照组(A组)、1μM新斯的明(B组)、3μM新斯的明(C组)、10μM新斯的明(D组)。A组给予生理盐水作为正常对照组。实验大鼠均经戊巴比妥钠腹腔麻醉,取出膈肌并去除周围的残留血液、脂肪组织等后,将膈肌沿肌纤维方向分离制成实验用肌条(约1cmX1.5cm)。肌条一端连于高精度张力换能器,通过放大器由生理记录仪记录张力大小。另一端固定于固定杆上并使整个肌条浸于注有苛氏液的麦氏槽中,槽中持续通入混合气(95%O2,5%CO2),温度维持37℃。固定后持续调节膈肌肌条前负荷为1g,平衡45-60分钟,每15分钟更换苛氏液一次[8]。平衡后用10-4M浓度的乙酰胆碱刺激两次,待再次达到平衡后,最终选择肌条张力维持在<(1±10%)g[13]范围内的肌条作为实验用肌条。继续给予银环蛇干毒毒素(浓度:5μg/ml),5分钟后冲洗并给予不同浓度的新斯的明(1μM、3μM、10μM)或生理盐水(对照组)。记录不同时间段(5min、10min、15min、30min、60min)膈肌肌条张力(g)大小。结果不同时间段A组、B组、C组、D组的肌条张力如下,5min时分别为:(0.846±0.019)g、(0.853±0.027)g、(0.853±0.024)g、(0.858±0.013)g;10min时分别为:(0.844±0.023)g、(0.860±0.033)g、(0.863±0.030)g、(0.912±0.026)g;15min时分别为:(0.846±0.033)g、(0.870±0.033)g、(0.873±0.024)g、(0.920±0.025)g;30min时分别为:(0.848±0.019)g、(0.870±0.029)g、(0.888±0.036)g、(0.932±0.013)g;60min时分别为:(0.860±0.024)g、(0.883±0.031)

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