血浆mirna-216ab在食管鳞状细胞癌中的表达水平及诊断价值分析-analysis of expression level and diagnostic value of plasma mirna - 216ab in esophageal squamous cell carcinoma.docxVIP

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血浆mirna-216ab在食管鳞状细胞癌中的表达水平及诊断价值分析-analysis of expression level and diagnostic value of plasma mirna - 216ab in esophageal squamous cell carcinoma

本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:日期:年月日血浆miRNA-216a/b在食管鳞状细胞癌中的表达水平及诊断价值分析研究生:董树岭导师:贺付成郑州大学第一附属医院检验科郑州450052摘要背景与目的食管癌(Esophagealcancer,EC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,我国是EC高发区。EC主要分为食管鳞状细胞癌(Esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)和食管腺癌(Esophagealadenocarcinoma,EAC)两种主要病理类型,ESCC是EC的主要类型,且主要发生于亚洲和非洲地区,而EAC则主要发生于西方国家。EC患者预后极差,总体5年生存率仅为15%-25%,而早期患者可提高至90%以上。MicroRNAs(miRNAs)是一类长度为17-25个核苷酸的单链非编码RNAs,通过与靶mRNAs的3-非翻译区(3-untranslatedregion,3-UTR)以碱基配对的方式结合,抑制靶mRNAs翻译或促进其降解,从而在转录后水平调节基因表达。研究表明,miRNAs可以调节人类约30%-60%的基因表达,在细胞的增殖、分化、凋亡、细胞周期、侵袭和转移等病理生理进程中发挥重要的调节作用。miRNAs被证实可以参与许多类型的癌症的发生和发展。循环miRNAs(circulatingmiRNAs)是指存在于外周血中的miRNAs,根据标本类型的不同,可分为血浆和血清miRNAs。越来越多的研究证实,循环miRNAs在多种肿瘤患者中异常表达,并在肿瘤的诊断、预后评估和疗效监测等I方面展现出巨大的临床应用价值。循环miRNAs被认为起源于相应肿瘤组织中,其表达水平与肿瘤组织呈现一定的相关性。且循环miRNAs能够抵抗RNA酶消化、强酸强碱环境和温度变化等条件,可稳定存在于外周血当中,因此循环miRNAs被认为是比较理想的肿瘤标志物。MiRNA-216a/b是miRNA-216家族的两个成员。近几年的研究表明miRNA-216a/b在诸如非小细胞肺癌、结肠癌、肝癌、口腔鳞状细胞癌和鼻咽癌等多种肿瘤中异常表达并参与肿瘤的发生发展,并且血浆miRNA-216a/b在诊断急性胰腺炎、胰腺癌和肝癌等疾病方面展现出潜在的临床应用价值。然而,目前为止,尚未见有关miRNA-216a/b在ESCC中的相关研究。本课题拟检测ESCC患者与正常对照、ESCC患者术前与术后血浆中miRNA-216a/b表达差异,并分析miRNA-216a/b表达水平与患者临床病理资料之间的关系,进而评价二者在诊断ESCC方面的临床应用价值,以期为ESCC的诊断提供帮助。方法1研究对象:于郑州大学第一附属医院胸外科收集120例ESCC患者作为实验组,并收集患者的临床病理资料;另招募同期于我院体检科进行体检的51例健康人为正常对照组。2血浆标本收集与保存:抽取120例ESCC患者入院第二天、术后(其中21例患者)及51例对照组外周血标本,并立即离心分离血浆,置于-80℃冰箱保存备用。3miRNAs表达水平检测:采用qRT-PCR方法检测所有血浆标本中miRNA-216a/b及内参基因miRNA-16表达水平,并采用target2?ΔCt(ΔCt=Ct-CtmiRNA-16)计算所有标本中miRNA-216a/b相对表达水平。4统计学分析:采用SPSS17.0统计学软件(SPSSInc.,USA)进行统计学分析。正态计量资料采用mean±SD表示,分类变量采用n(%)表示,两组独立样本的比较采用独立样本t检验或Mann-WhitneyU检验,配对样本的比较采用配对样本t检验,三组或三组以上样本之间的比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验。ROC(receiveroperatingcharacteristic)曲线分析和曲线下面积(areaunderthecurve,AUC)用于评价血浆miRN

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