快速检测基础知识及应用ppt课件.ppt

根据酶标记物的不同，酶免疫法可以分为 * 根据检测原理的不同，分子生物学快速检测技术可以分为 * 根据单体和模板分子结合的方式的不同 * 1.5直接外荧光滤过技术（DEFT） 1.6“即用胶”系统(SimPlate) * * 根据生物传感器中信号检测器上的敏感物质分类 * * 本节内容设计到的术语检测、检验、测试、试验统统指Testing * 按照两种不同的分类方式进行分类 通过对不同分类方式的类比来正确认识检测的概念； * 按照检测操作的便捷性以及准确度分类 快速检测概念的来源： 快速检测的概念是相对于确认检测的概念，快速检测没有经典的定义。 确认检测通常采用复杂的前处理及精密仪器进行，时间长，成本高； 快速检测：包括样品前处理，能够短时间内出具检测结果的行为称为快速检测。 通常认为，理化检验方法一般在两个小时内能够出结果的即可视为快速方法； 微生物检验方法与常规方法相比，能够缩短1/2或1/3时间出具有判断性意义结果的方法即可视为快速方法； * 人员：快速检测不需要大量专业培训，确认检测部分项目要专业培训，并持有上岗证，比如微生物检测等。 设备：快速检测设备一般可以移动，可以携带，比如农残速测仪，确认检测设备一般不可以移动，比如GC、GC-MS、HPLC、HPLC-MS、AAS、AFS等。 耗材：快速检测所用耗材包括速测卡、速测试剂盒，价格低廉，便携性强；确认检测所用耗材包括各种化学试剂、昂贵的配件等。 方法：快速检测采用试剂盒或速测卡供应商提供的操作说明书规定的操作步骤操作；确认检测采用的方法往往已经经过确认或是公认的方法； 环境条件： * 按照检测的性质来分类 定性检测解决的是待测样本中有没有含有目标物，待测样本是不是目标物； 定量检测解决的是待测样本中含有多少目标物。 * 定量检测本身包括定性检测，如果不能准确定性，那么定量无法进行或者定量的结果是没有意义的。 微生物致病菌的鉴定属于定性检测。 * * * 判断某种检测方法是何种类型的关键是判断该方法是否具有给出准确结果的能力。 * 快检测方法类型基本上都属于定性检测和半定量检测。 * 准确度：测量结果与被测量的真值之间的一致程度；准确度是个定性的概念，只能描述，不能用数值表示，比如，准确度高/低；准确度等级一级、二级等。 包含2个概念： 正确度：大量测量结果的平均值与真值或接受参照值之间的一致程度，它表示测量系统中系统误差的影响；定量概念，可以用数值表示；通常用偏倚表示：测量结果的期望值与真值或接受参考值之差表示。 精密度：测量结果之间的一致程度，表示测量中各种随机误差的影响。定量概念，可以用数值表示。精密度的度量用重复性和再现性表示，标准差、方差、变异系数、临界极差、重复性限、再限性限 * 定量检测的准确度可以用正确度和精密度来描述，因为定量的结果时数值，正确度和精密度可以通过数值运算得出； 定性检测的准确度如何描述？ * 可靠性：指一项试验在相同条件重复使用获得相同结果的稳定程度（stability）；定量检测通过测量变异系数的大小来判断； 真实性：真实性是指测量值与实际值的符合程度； 对于定性检测，如何来量度可靠性和真实性？ * 如何评价定性检测的可靠性和真实性 为什么用临床疾病诊断为例，也属于定性检测，有病，没病？对应的描述为阳性，阴性； * 要评价一种新的诊断试验方法，首先要确定一个参照标准 即金标准（gold standard）。 一项诊断试验的准确程度只有在金标准诊断的病人组和非病人组中进行考核，才能得到正确的评价。 对某种疾病的诊断方法很多， 所谓“金标准”是指当前临床医学界公认的诊断疾病的最可靠、最准确、最好的诊断方法，也称标准诊断方法。 对于检测来说，确认检测就属于检测中的“金标准” * * * * Kappa值：表示两种试验的一致性程度 * 真实性是指测量值与实际值的符合程度 一项试验方法得出的正确结果越多，则该试验的真实性越高。评价试验方法的真实性包括两个方面，即对有病和无病的识别能力。 * * * * * * * 胶体金免疫法更倾向于定性检测，而酶联免疫法更倾向于定量检测 为什么酶联免疫法认为是半定量的方法，而不是定量方法，因为，酶联免疫法影响检测结果的因素太多，比较难控制。 * * 按照检测的原理分类，快速检测技术可以分为6类 * 按照快速检测实施的环境可以分为2类 现场 * 根据检测使用的工具分类 * 根据检测的原理分类 * 如何用数值描述定性检测的可靠性和真实性？ 金标准 试验结果 金标准 合计 有病（阳性） 无病（阴性） 阳性 a（真阳性） b（假阳性） a+b 阴性 c（假阴性） d（真阴性） c+d 合计 a+c b+d a+b+c+d 粗一致率（crude agreement, CA）是指试验结果与金标准结果