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- 2018-06-05 发布于贵州
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第2讲植物的人工繁殖 PPT课件
引言 /v_show/id_XODYyMTM0OTI=.html 1.定义 2.人工种子的优点 3.关键技术问题 (2)人工种皮制作 (3)人工胚乳配制 (4) 包埋 海藻酸钠包埋示意图 (5)贮藏与发芽 4.存在的问题 /v_playlist/f1461876o1p6.html 下节内容 ③铁盐母液:由于铁离子与其他无机元素混在一起放置时,容易生成沉淀,所以铁盐必须单独配制成铁盐母液。铁盐一般采用螯合铁(Fe-EDTA)。通常配制成100倍(或者200倍)浓度的铁盐母液,在使用时,每配制1000mL培养液,吸取10mL(或者5mL)铁盐母液。 ④维生素母液:是各种维生素和某些氨基酸的混合液。一般配制成100倍浓度的母液。在使用时, 每配制1000mL培养液,吸取10mL母液。 ⑤植物激素母液:各种植物激素单独配制成母液。一般浓度为100mg/L 。使用时根据需要取用。由于大多数植物激素难溶于水,需要先溶于有机溶剂或者酸、碱溶液中,再加水定容到一定的浓度。它们的配制方法如下: 2,4-D (2,4-二氯苯氧乙酸)母液:称取2,4-D 10mg, 加入2mL 95%乙醇,稍加热使之完全溶解,(或者用2mL 1mol/L的NaOH溶解后)加蒸馏水定容至100mL。 IAA(吲哚乙酸)母液:称取IAA 10mg,溶于2mL 95%乙醇中,再用蒸馏水定容至100mL。 IBA(吲哚丁酸),GA(赤霉酸)母液的配制方法与此相同。 NAA(萘乙酸)母液:称取NAA 10mg ,用2mL 热水溶解后,定容至100mL。 KT(激动素)母液:称取KT 10mg, 溶于2mL 1mol/L 的 HCl中,用蒸馏水定容至100mL。BA(苄基腺嘌呤)母液的配制方法与此相同。 玉米素母液:称取玉米素10mg, 溶于2mL 95%的乙醇中,再加热水定容至100mL。 4、植物组织培养的基本步骤 (1)培养材料的采集 植物具有全能性的细胞:受精卵;发育中的分生组织细胞;雌雄配子及单倍体细胞。 用哪一部分器官最适于作为组培的材料来源;器官的生理状态和年龄;取材季节、离体材料的大小、取得离体材料的植株质量等。 快速繁殖:常用茎尖(长度0.5cm); 脱毒苗:茎尖分生组织(长度小于0.1mm); (2)培养材料的消毒 ①先将材料用自来水洗干净,最后一遍用蒸馏水冲洗,再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小块。 ②在无菌环境中将材料放入70%的酒精中浸泡30-60s。 ③再将材料移入漂白粉饱和液或0.01%升汞中消毒。 ④无菌水冲洗3~4次。 常用的消毒剂: 下表列出了目前常用的灭菌消毒剂。其使用浓度和处理时间,应根据外植体的情况及其对灭菌剂的敏感性而定。 消毒剂 使用浓度(%) 去除消毒剂难易 消毒时间(min) 灭菌效果 次氯酸钠 次氯酸钙 漂白粉 升汞 酒精 过氧化氢 溴水 硝酸银 抗生素 2 5~10 饱和溶液 0.1~1 70~75 10~12 1~2 1 4~50mg/L 易 易 易 较难 易 最易 易 较难 中 5~30 5~30 5~30 2~10 0.2~2 5~15 2~10 5~30 30~60 很好 很好 很好 最好 好 好 很好 好 较好 (3)制备外植体 接种时外植体的大小和形状取决于实验目的(茎、叶、根、花、果实、种子或其中某种组织切块0.5cm,茎尖、胚、胚乳按组织单位切离) (4)接种和培养 接种 封口 温度 增殖:新梢形成后,继代,把新梢分株或切段转入增殖培养基中进行增殖。 (5)根的诱导 生根是获得完整植株的一个关键。通过腋芽、不定芽、愈伤组织途径产生的芽长成试管苗,必须诱导生根才能移植。 促使试管苗生根的方法通常有两种: 一种是在固体培养基上诱导生根。当试管苗长到2~3厘米高时,将它从基部切下,转移到固体培养基上生根(生根培养基一般要求降低矿物营养的浓度,提高生长素的浓度,具体应根据植物不同而定) 。 另一种是浸泡的方法,将切下的无根试管苗泡在含有高浓度生长素溶液中,生长素浓度为100毫克/升左右,浸泡时间从几小时到1天,然后取出接种于不加任何激素的MS培养基上或者扦插在人工基质上,十天左右即可生根。 (6)炼苗和移栽试管苗的生长环境无菌 异养 弱光 恒温 芦荟的植物组织培养过程 1 2 3 4 5 6 7
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