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核酸学生

第64页/共95页 (二)双链线性DNA(dsDNA)分子 存在于真核生物的染色质和一些病毒中。 第65页/共95页 五、DNA和基因组 本部分为自学内容。 第66页/共95页 六、RNA的结构和功能 ① 组成RNA的戊糖是核糖,主要碱基: A、U、G、C, U替代DNA中的T,还常有一些稀有碱基。 ② RNA的结构单位主要是四种核苷酸:AMP、GMP、CMP、UMP。 ③ 核苷酸连接方式:3′, 5′- 磷酸二酯键。 ④ 天然RNA分子都是单链线形分子(有些病毒是双链) ,可自身回折,形成局部双螺旋(A-型,A=U、G≡C),RNA中约40%-70%的核苷酸参与螺旋的形成。 ⑤ 稳定性较差,易水解。 第67页/共95页 第68页/共95页 (一)tRNA(transfer RNA) 1. tRNA概况: (1)含量:占细胞内RNA总量的15%。 (2)种类:50-60种, 真核可达100多种(同工tRNA:运载同一氨基酸的几种tRNA)。 (3)分子量:23-28kD,4S。 (4)功能:专一携带氨基酸,是氨基酸运载工具。有些tRNA可作为反转录酶的引物,参与DNA的合成。 第69页/共95页 2. tRNA一级结构 (1)组成:70-90个核苷酸(标准:76nt)。 (2)不变和半不变的核苷酸:约有20多种。 半不变的核苷酸主要是嘌呤或嘧啶间的互换的核苷酸。 (3)TψCG序列:54-57位,与 5S rRNA结合并与 tRNA 空间结构有关。 (4)修饰碱基(修饰核苷酸):转录后加工而形成,2-19个,70多种,占10%。 第70页/共95页 3. tRNA的二级结构 tRNA的二级结构都呈“三叶草” 形状,一般可将其分为四臂四环: 四环 二氢尿嘧啶环:8-12nt 反密码环:7nt TψC环:7nt 额外环4-5nt 可变 四臂 氨基酸臂:7bp 3′-CCA 二氢尿嘧啶臂:D臂 3bp 反密码臂:5bp TψC臂:5bp 第71页/共95页 酵母tRNA Ala 的二级结构 DHU环 I G C 反密码子 反密码环 氨基酸臂 可变环 C C A Ala 3′ 5′ TψC环 第72页/共95页 第73页/共95页 4. tRNA的三级结构 倒“L”形,是所有tRNA折叠后形成大小相似及三维构象相似三级结构,这有利于携带的氨基酸的tRNA进入核糖体的特定部位。 第74页/共95页 (二)mRNA(messenger RNA) 概念:1961年Jacob和Monod提出用信使RNA命名。是带有从DNA上的到信息并指导蛋白质合成的一类RNA分子,称信使RNA。 含量:3-5% 平均分子量50万,8S。 功能:蛋白质合成模板(遗传密码)。 hnRNA:真核生物RNA前体,需剪接、加工后为成熟的mRNA。 第75页/共95页 (三)rRNA (ribosomal RNA) 占RNA总量的80%,与蛋白质结合组成核糖体,是生物体内蛋白质合成的场所。 种类: 细菌有16S、5S、23S三种,组成30S的转录单位。 真核生物有18S、5.8S、28S和5S四种,前3种组成45S的转录单位,5S rRNA单独转录。 rRNA的二级结构:茎环结构 第76页/共95页 大肠杆菌 5S rRNA 结构 第77页/共95页 七、核酸的理化性质 核酸的结构特点:分子大,有一些可解离的基团,具有共轭双键等。 (一)一般理化性质 1. 两性电解质。含有磷酸基和碱基,但表现为酸性。 2. RNA纯品是白色的粉末,DNA为疏松的石棉一样的纤维状固体。 3. 线性大分子,极不对称,具有粘度高,抗剪切力差等特点。 第78页/共95页 3. 溶解性:RNA和DNA都是极性的化合物,一般都微溶于水,不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂,但其钠盐易溶于水。 4. RNA的磷酸二酯键对碱敏感,室温下,被稀碱水解为2′- 或3′- 核苷酸。DNA在碱中虽变性,但不被水解,所以DNA更稳定。 5. 鉴别DNA和RNA的反应: RNA:D-核糖 + 浓盐酸 + 苔黑酚 → 绿色 DNA:D-2-脱氧核糖 + 酸 + 二苯胺 → 蓝紫色 第79页/共95页 (二)核酸的紫外吸收 1. 核酸中的碱基有共轭双键体系,有独特的紫外线吸收光谱,其吸收峰240-290nm,最大吸收峰260nm。 2. 天然

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