细胞化学染色ppt课件.ppt

原理 NAS-DAE存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中，是一种中性非特异性酯酶。 血细胞内的 NAS-DAE在pH中性的条件下水解基质液中的醋酸AS-D萘酚，释放出AS-D萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联成不溶性的有色沉淀定位于细胞质内酶所在的部位。 正常细胞的染色反应 粒细胞系统中，原始粒细胞阴性或阳性，早幼粒细胞至成熟粒细胞均阳性，阳性反应不被氟化钠抑制，其他血细胞染色基本同ɑ-NAE染色。 临床意义 基本同ɑ-NAE，用以辅助鉴别急性白血病细胞类型。 应用评价 基本同ɑ-NAE ɑ-丁酸萘酚酯酶染色 ɑ-naphthol butyrate esterase ɑ-NBE 实验原理 ɑ-NBE主要存在于单核细胞中，是一种非特异性酯酶。血细胞中的ɑ-NBE在PH碱性条件下，水解基质内的ɑ-丁酸萘酚并释放出ɑ-萘酚，后者与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性有色沉淀，定位于胞质内酶所在的位置。 正常细胞染色反应 1.粒细胞系统：各阶段粒细胞皆阴性。 2.单核细胞系统：分化差的原始单核细胞呈阴性，分化好的原始单核细胞呈阳性，幼稚单核细胞及单核细胞呈阳性，阳性反应被氟化钠抑制。 3.淋巴细胞系统：T淋巴细胞、非T非B淋巴细胞可呈阳性，B淋巴细胞呈阴性。 4.其他细胞：巨核细胞、有核红细胞、浆细胞呈阴性或弱阳性，组织细胞也可呈阳性，但不被氟化钠抑制。 临床意义 与ɑ-NAE染色的临床意义相同： 1.急性单核细胞白血病中的细胞大多数呈阳性，阳性反应能被氟化钠抑制 2.急性粒细胞白血病中的原始粒细胞一般呈阴性 3.急性早幼粒细胞白血病中的早幼粒细胞常呈阴性 4.急性粒单核细胞白血病：单核系部分白血病细胞阳性，粒系部分白血病细胞阴性。 5.急性淋巴细胞白血病中的原始淋巴细胞及幼稚淋巴细胞一般呈阴性。 酯酶双染色 在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。一般采用一种特异性酯酶染色加一种非特异性酯酶染色，故常用的有ɑ-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、ɑ-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。 酸性磷酸酶染色 acid phosphatase ACP 实验原理 酸性磷酸酶（ACP）存在于细胞的溶酶体颗粒中，有些细胞中的酸性磷酸酶耐酒石酸，故抗酒石酸酸性磷酸酶染色有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。染色方法有偶氮偶联法和Gomori硫化铅法，前者常用。 偶氮偶联法：血细胞内的酸性磷酸酶在酸性（pH5.0）条件下水解基质中的磷酸萘酚AS-BI，释放出萘酚AS-BI，后者与基质中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞之内酶所在的部位。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色：用相同的方法制备两份基质液，一份加入适量的L-酒石酸（左旋酒石酸），另一份不加酒石酸。取同一份骨髓标本的两张涂片，分别用这两种不同的基质液做酸性磷酸酶染色。如果血细胞内的酸性磷酸酶耐酒石酸，两张均呈阳性；如不耐酒石酸，不加L-酒石酸呈阳性反应，二甲L-酒石酸呈阴性反应。 正常细胞染色反应 粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞呈阳性。 临床意义 1.多毛细胞白血病呈阳性（长强阳性），阳性反应不被L-酒石酸抑制。慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞和恶性淋巴瘤细胞ACP染色也可呈阳性，但被L-酒石酸抑制。 2、戈谢细胞阳性，尼曼匹克细胞阴性。 3、T淋巴细胞阳性，B淋巴细胞阴性。 应用评价 ACP染色在多毛细胞白血病中最具特征性，所以主要用于多毛细胞白血病的诊断，其次是在戈谢病和尼曼匹克病应用。这些疾病在临床上均很少见，故常因为标本过少而导致试剂过期。 组织化学染色小结 在急性髓系白血病骨髓中，以原始和幼稚细胞增生为主，仅仅根据瑞氏染色下的细胞形态容易做出错误判断，因此不论急性白血病细胞形态表现是否典型，均应做细胞化学染色。 建议急性白血病至少应做：过氧化物酶染色、特异酯酶染色、非特异性酯酶染色、及过碘酸-雪夫反应。 白血病细胞具有高度特异性，同一类型白血病细胞在不同患者中，其细胞化学成分也不尽相同，经常会出现细胞化学染色结果不典型、模棱两可或结果与形态不相符的现象。 感谢您的关注！ * P o w e r B a r 中国专业PPT设计交流论坛 原理 过碘酸是氧化剂，能使含有乙二醇基的多糖类物质（糖