抑瘤宁对荷人结肠癌hct8裸鼠的抑癌作用及对血管内皮生长因子及微血管密度的作用-anti - tumor effect of anti-tumor ning on nude mice bearing human colon cancer h ct8 and its effect on vascular endothelial growth factor and microvessel density.docxVIP

摘要摘要背景z恶性肿瘤是严重威害人类健康的一种疾病，由于大多数肿瘤发现时已为晚期，目前对晚期肿瘤的泊疗无论是手术、化疗、放疗泪?是免疫疗法等，都各有其适应症和禁忌症。总的来说，综合治疗，也就是中西医结合、内外兼顾的泊疗较为理想。近年来，国内外越来越多的学者热衷于研究中医药对惑性肿瘤的治疗作用，从抗肿瘤中药的单药到中药复方制剂都取得了可喜的成果。如抗肿瘤单咪中药z紫杉醉、喜树碱衍生物，中药复方制剂如z康莱特注射液在非小细胞肺癌等肿瘤的泊疗，华蜡素在消化系肿瘤的应用，消癌平在胃癌食管癌等多种肿瘤中的服用。这些足以说明中药抗肿瘤布广阔的前景，本实验中的抑瘤宁由冬夜草、龙葵、刺五加、蛇莓四味中药成分组成，具布清热解毒、消肿.散结、扶正剧本、补益健牌之功效。前期对抑瘤宁的体外实验研究已取得了一定成果，本实验将继续从体内实验探讨抑瘤宁的作用及其作用机理。第一部分抑瘤宁对荷人结肠癌HCT-8裸鼠的抑癌作用目的:通过建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型，给于抑瘤宁泊疗，检测抑瘤于对人结肠癌原位移植瘤生长的影响。方法:购买4周龄BALB/c雄性裸小鼠30只，体熏20克左右，于无特定病原体(叩四ified.pa也ogens岳阳，SP盯环境下饲养，环境温度、温度适宜，无菌饲料及灭菌纯净水饲养，在37.C含5%C02培养箱中培养人结肠癌细胞株HCT-8，取对数生长期的结肠癌细胞，用生理盐水制作成细胞密度为10X107/ml的细胞悬液。在裸鼠右侧腋窝皮下接种上述细胞悬液O.2ml建立种植瘤模型，定期观察，游摘要标卡尺测量肿瘤的长径(啡、短径(b)，按公式V=ab2/2，计算肿瘤近似体积，接种14天后形成稳定的皮下移植瘤。随将30只裸鼠随机分为5组，空白对照组、希罗达组、抑瘤宁低、中、商剂量组。抑瘤宁的三种浓度分别为35%、70%、105%，希罗达浓度为2%，空白对照组给蒸馆水，均按照0.2ml/l0g(裸鼠体蠢〉潜胃给药，每天一次，连续用药4周，末次用药24小时后颈椎脱臼处死小鼠，切取种植瘤组织，心肝脾肺肾脏器，置于4%多聚甲醒溶液中固定，观察各组裸鼠的一般状况，各级原位移植瘤的瘤体积，瘤童及用药前后裸鼠体重的变化，绘制肿瘤生长曲线，计算抑瘤惑。结果z1、30只裸鼠实验期间无一死亡，成瘤率为100%，成瘤时间为接种后6-10天，于接种后14天肿瘤直径平均达5mm，造模成功。2、空白对照组裸鼠肿瘤迅速生长，生长曲线较陡直;，其余各组肿瘤生长缓慢(PO.OI)，生长曲线在较长的一段时间内均较平缓:空白对照组、希罗达细、低剂最组、中剂量组和高剂量组用药前后体重差分别:8.520伽0.99599、-3.4167土2.38446、2.6333土0.55737、4.ω00土0.40000、6.4759土1.10348，希罗达组与空白组相比差异有显著性(P0.01)抑瘤宁低、中、商、剂量组与空白组比较差异均有统计学意义z高剂最组(P0.05)，抑瘤于低、中剂最组(PO.OI).空白组、希罗达组、低、中、高剂最组平均瘤蠢(g)分别为:1.4683土0.16845、0.8567土0.12388、123.33士0.29132、11.583士0.17646、101.50士0.176950希罗达组、低剂量组、中剂量组和高剂量组与空白组相比差异有显著性z希罗达(PO.Ol)低、中、高剂最组(P0.05);各组抑瘤率分别为z希罗达组42.18%;低剂量组16.33%;中剂量组21.77%;高剂最组31.29%;和空白组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论:抑瘤于对荷人结肠癌裸鼠有抑癌作用。一一一一…一一…一一一飞摘要第二部分瘤宁抑制荷HCT-8人结肠癌裸鼠移植瘤的机瑕探讨目的z研究抑捕宁抑制荷HC下8人结肠癌裸鼠移植瘤的作用机制。方法:取第一部分各组裸鼠移植瘤和裸鼠脏器的石蜡标本，进行常规HE染色、SP法免疫组化染色，检测移植瘤组织中的MVD，VEGF表达和各组脏器情况。结果:1、各组动物的心肝脾肺肾脏器的HE染色镜下未见明显毒性表现:各组的肿瘤组织的HE染色镜下均可见明显的细胞核异常现象:核大，深染，多核，核碎裂等现象。2、VEGF蛋白表达主要位于细胞胞浆、核膜上，为棕黄色或褐色颗粒;第vl11因子显色主要位于细胞胞浆、核膜上，也为棕黄色或褐色颗粒。空白组、希罗达组、低剂最组、中剂量组和高剂量组瘤组织内的VGEF蛋白表达阳性百分率分别为45.1667士2.71416、26.1667:士1.16905、36.3333士2.94392、33.500如0.83666、30.4∞0土6.70358，各个用药组和空白组比较差异均有显著性(p0.01)，微血管密度(MVD)平均值分别为:34.3333士3.07679、12.1667士1.72240、26.8333:1:3.18852、23.5ω