曲尼斯特对大鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及p、c-myc表达影响.docxVIP

曲尼斯特对大鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡及 p57、c-myc 表达的影响硕士研究生秦辉导师刘厂辉中 文 摘 要目的 观察曲尼斯特对大鼠血管平滑肌细胞（AVSMC）增殖、凋亡及对 p57、c-myc 表达的影响，初步探讨其可能的作用机制。方法 酶消化法原代提取 SD 大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外培养，取 5-8 代细胞进行实验。细胞按药物加入浓度不同共分为 5 组，分别为曲尼斯特 0、12.5、25、50、100mg/L 组，MTT 比色法测定药物处理 12、24、48 小时后各组细胞增殖速率，流式细胞学和原位细胞凋亡检测试剂盒法（TUNEL）检测药物处理 12 小时后细胞凋亡情况，RT-PCR 法分别检测药物作用 48 小时后 p57 表达及作用 12 小时后 c-myc 表达情况。结果 MTT 比色法观察发现不同浓度曲尼斯特组细胞生长率较对照组降低，其生长抑制率随曲尼斯特加入浓度和时间增加而增加（P〈0.05），表明曲尼斯特抑制VSMC 增殖在一定范围内存在浓度和时间依赖，经 RT-PCR 扩增后，凝胶成像可见 VSMC 中 P57 表达随药物浓度的增加而增加，提示曲尼斯特可能通过诱导 p57表达抑制细胞增殖；流式细胞学和原位细胞凋亡检测试剂盒法（TUNEL）检测 VSMC细胞凋亡示细胞凋亡率较对照组增加,并且随着曲尼斯特浓度的增加 VSMC 凋亡率越来越高（P〈0.05），表