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酶工程-第九章-酶反应器-(二) 蛋白质与酶工程
蛋白质与酶工程 Chapter 9 Reactors for Enzymatic Catalysis 第九章 酶反应器 Contents of chapter 9 9.4 酶反应器的选择 依据酶的应用形式 游离酶 固定化酶 依据酶反应动力学性质 依据底物 / 产物理化性质 其他考虑因素 操作的简便性 运行的经济性 酶反应器的选择 —— 酶的应用形式 游离酶适用的反应器 特点:均相反应 常用:搅拌罐式反应器 有气体参与:鼓泡式反应器 昂贵的酶:酶膜反应器 —— 酶回收较容易 耐高温酶:喷射式反应器 游离酶不宜采用的反应器 填充床式反应器(原因 ?) 流化床式反应器(原因 ?) 酶反应器的选择 —— 酶的应用形式 固定化酶适用的反应器 特点:非均相反应,多采用连续式操作 影响因素:固定化酶的形状、颗粒大小、稳定性 颗粒状固定化酶/细胞 搅拌罐式反应器 —— 桨叶剪切力大,对颗粒有机械强度要求 填充床式反应器 —— 颗粒堆积密度大;床层压降大 流化床式反应器 —— 混合效果好;动力消耗大;有机械强度要求 鼓泡式反应器 —— 即“三相流化床” 非颗粒状固定化酶/细胞 —— 膜反应器 固定化酶不宜采用的反应器 喷射式反应器(原因 ?) 酶反应器的选择 —— 依据酶反应动力学性质 影响因素:1) 酶与底物的混合程度 要使酶与底物有效结合,必须保证酶与底物分子有效地碰撞 混合效果好 搅拌罐式反应器 流化床式反应器 鼓泡式反应器 混合效果较差 填充床式反应器 膜反应器 改善混合特性 —— 辅助搅拌 酶反应器的选择 —— 依据酶反应动力学性质 影响因素:2) 底物浓度及其抑制作用 底物的浓度受其对酶抑制情况的制约 ? 防止底物浓度过高 游离酶 酶膜反应器 ? 连续式操作 搅拌罐式反应器 ? 流加式操作 / 连续式操作 固定化酶 搅拌罐式反应器 填充床式反应器 流化床式反应器 酶膜反应器 酶反应器的选择 —— 依据酶反应动力学性质 影响因素:3) 产物浓度及其抑制作用 产物的过度积累造成抑制 ? 设法将产物移出反应器 游离酶 —— 酶膜反应器 固定化酶 —— 酶膜反应器、填充床式反应器 影响因素:4) 酶反应温度 耐高温酶 ? 喷射式反应器 优点:加速反应,缩短反应时间,催化效率高 酶反应器的选择 —— 依据底物 / 产物理化性质 底物 / 产物的物理状态 溶解状态(包括乳浊液) 颗粒态 高黏度液体 含气体 分子量较大 具有辅酶的反应 Contents of chapter 9 9.5 酶反应器的设计 一、确定酶反应器的类型 二、确定酶反应器的制造材料 三、进行热量衡算 四、进行物料衡算 9.5 酶反应器的设计 步骤一:确定酶反应器的类型 →反应器的选择 步骤二:确定酶反应器的制造材料 →一般用不锈钢即可 9.5 酶反应器的设计 步骤三:热量衡算 →酶催化反应一般在30~70℃,热量衡算简单 →根据冷却水的流量和温度变化来计算 →喷射式反应器:根据蒸汽的热焓和用量计算 9.5 酶反应器的设计 步骤四:物料衡算——直接决定产量和产率 (1) 确定酶反应动力学参数 (2) 计算底物用量 (3) 计算反应液总体积 (4) 计算酶用量 (5) 计算反应器数目 (1)确定酶反应的动力学参数 底物浓度 →通过米氏方程定量 →注意底物抑制情况 酶浓度 →考虑生产成本问题,不宜使用过多的酶 温度、pH 值 ? 最适温度、最适pH 激活剂、抑制剂 ? 激活 / 抑制动力学 (2)计算底物用量 底物用量 S:由产量 P、产物转化率 YP/S 和收得率 R 计算得到 产物转化率YP/S : 收得率R: (3)计算反应液体积 反应液总体积 Vt :由底物用量及其初始浓度计算 (4)计算酶用量 (5)计算反应器数目 反应器的有效体积 可容纳反应液的最大体积,一般为70%~80% 反应器数目 分批式反应器: 连续式反应器: Contents of chapter 9 酶反应器的操作 操作条件确定及其调控 反应温度:最适温度;冷却/加热系统进行控制 pH 值:最适pH;稀酸/稀碱/缓冲液 底物浓度:5~10 Km 酶浓度:底物足够时,酶浓度越高反应越快;经济因素 搅拌速度:过快,剪切力大;过慢,混合效果差 流动速度(连续式):过快,接触时间短;过慢,混合效果差 酶反应器操作注意事项 搅拌速度 搅拌的目的:加强底物与酶的碰撞;强化热量传递 控制搅拌速度,防止过快或过慢 流动速度(连续式反应器) 酶反应器注意事项 1、保持酶反应器的操作稳定性 2、防止酶的变性失活 3、防止微生物的污染 1、保持反应器操作的稳定性 (1) 控制酶反应器中的流动状态 流动方式不当造成的后果 1、保持反应器操作
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