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共振瑞利散射测定核酸和抗生素的新方法研究 —●———————一——一————一 摘 要 (共振瑞利散射(RRS)方法是近几年迅速发展起来的新分析技术，因其灵敏度 高、选择性好、操作简便等显著特点而备受分析工作者的关注。目前，它已广泛应 用于攘酸、蛋白质等生物大分子及痕量元素的测定，用于抗生素类药物的分析鲜见 报道√本文研究了盐酸氯丙囔一核酸，氨基糖苷类抗生素．核酸，阳离子表面活性剂． 核酸，酸性双偶氮一氨基糖苷类抗生素和镧(III)．四环素类抗生素等五种新体系的 RRS光谱极其在核酸和抗生素测定中的应用，探讨了它们的光谱特性、影响因素、 分析参数和实际应用，建立了方便、快速测定核酸和抗生素药物的新方法。其中， 阳离子表面活性剂一核酸体系可用于纳克级核酸的分析；氨基糖营类抗生素一核酸体 系中．庆大霉素和卡那霉素对DNA测定具有很好的特异性，对RNA不产生响应信 号；镧(III)一四环素类抗生素体系对测定金霉素和强力霉素有很高的选择性，而结 构与性能相似的四环素类其他成员如土霉素及四环素则无RRS响应，这与量子化 学半经验稗序计算结果一致。 一 盐酸氯丙嗪．核酸体系 厂、 pH2—3的BR缓冲溶液中，核酸与盐酸氯丙嗪作用，产生强烈的共振瑞利散 射信号，最大散射峰位于400nm。以小牛胸腺DNA为例，研究了体系适宜条件及 强度成线。rl：关系．检测限分别为7．6ng／mL(ctDNA)、11．3ng／mL (sDNA)和28 4ng／mL(yRNA)。用于四个合成样的分析，准确性高，重复性好。 ．氨躲糖营类抗生素．核酸体系 n泻日酸性BR缓冲溶液中，核酸与新霉素、卡那霉素、妥布霉素和庆大霉素等 氰j占栅_．1=炎抗生素反喧，产：生强烈的共振瑞利散射信号，四种抗生素一核酸体系具有 相似的RRS光谱图．最大共振峰位于470nm附近。用于核酸的测定，线性范围广 5．6(GEN)，20．6(KA NA)，1 2．4(TOB)，l k那霉素对DNA测定具有很好的特异性，对RNA无信号响应。用于合成样品的分 析，结果满意。 三．阳离子表面活性剂．核酸体系 在弱酸或弱碱性BR缓冲介质中，溴化十六烷基吡啶(CPB)、溴化十四烷基毗 及长链烷基的疏水作用而导致共振瑞利散射显著增强，最大共振峰位于470nm处。 测定则有较宽的线性范围，均超过8．01．tg／mL。文中重点讨论了各体系灵敏度与阳离 子表面活性剂(CS)性质的关系；总结出RRS强度与CS的浓度和分子量之间的规 律以及CS的浓度对核酸构象的影响。方法用于合成样品中核酸的测定，结果满意。 四．某些酸性双偶氮染料．氨基糖苷类抗生素体系 料在酸性条件下，与硫酸卡那霉素、硫酸新霉素、硫酸庆大霉素和硫酸妥布霉素等 氨基糖苷类抗生素形成离子缔合物，从而产生强烈的共振瑞利散射信号，最大散射 峰分别位r 榆测限14．4．36．8ng／mL。四种染料用于测定抗生素，TR．抗生素体系灵敏度最高；对 I¨；抚，￡素注射液或滴耳液分析，获得满意结果。 血La。．四环素类抗生素分析 422n,n{DOTC—La。)。灵敏度lU达(x10。9 埘测定会霉素和强力霉素有特异性，而结构和性能相似的四坏素族其他药物如四环 算结果一致。由此建立测定上述药物的高选择性、高灵敏度RRS法，用于合成样 Il^el,CTC及DOTC的测定，结果满意。，1 | A fortheDeterminationofNucleicAcidsand ontheNewMethods Study AntibioticsResonance by RayleighScattering Abstract Resonance anew