MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性研究.docVIP

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性研究 　　[摘要] 目的:探讨3-(4,5)-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法:应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果:对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论:MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。 　　[关键词] MTT法;药物敏感试验;乳腺癌 　　[中图分类号] R737.9 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)01(c)-028-02 　　 　　Study on chemosensitivity of breast cancer with MTT assay 　　JIANG Ze1, XU Hua2, LI Shengshui2, ZHANG Fengmei2, LI Shuangbiao2, LIU Yan2 　　(1.Cangzhou Central Hospital, Cangzhou 061001, China; 2.Cangzhou Combination of Chinese Traditional and Western Medicine Hospital, Cangzhou 061001, China) 　　[Abstract] Objective: To explore the value of MTT assay in vitro for patients with breast cancer. Methods: Chemosensitivities of ten chemotherapy drugs to cells of the breast cancer were detected by MTT assay. Results: The breast cancer cells were hypersensitive to anticancer drug of PTX, NVB, VP-16, 5-FU, DDP; hyposensitive to VCR, ADM, MTX, MMC, HCPT. Conclusion: MTT assay can help to select chemotherapy drugs and compose reasonable individual chemotherapeutic scheme. 　　[Key words] MTT assay; Drug sensitivity test; Breast cancer 　　 　　乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤,术后通常辅以放、化疗。由于肿瘤细胞的异质性,往往不同乳腺癌患者的癌细胞对同种药物的敏感性是不同的。本实验采用3-(4,5)-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法体外进行乳腺癌细胞原代培养,检测10种化疗药物对不同个体乳腺癌细胞的细胞毒效应,旨在探讨该方法在筛选乳腺癌较敏感的药物和指导临床乳腺癌个体化治疗中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 标本来源2004年11月~2006年12月乳腺癌根治标本50例,其中,来自沧州中西医结合医院22例,沧州市中心医院12例,沧州市人民医院5例,沧州市和平医院3例,泊头市医院3例,青县医院2例,黄骅市医院2例,东光县中医院1例。患者全部为女性,年龄29~75岁,平均43岁。所有病例均为首次治疗,术前未行放、化疗,且经术前穿刺活检或术后病理证实。 　　1.1.2 仪器MCD-15AC型CO2培养箱(日本Sanyo公司产品),DNM-9600型酶标分析仪(北京普朗公司产品),XDS-1B型倒置显微镜(重庆光学仪器厂产品),BFX5-320型医用低速离心机(浙江省白洋离心机厂产品),生物安全Ⅱ级实验室及Ⅱ级生物安全柜(河北省长风净化设备厂产品)。 　　1.1.3 主要试剂RPMI 1640培养液,小牛血清,含10种化疗药物的微孔检测板,MTT试剂,二甲基亚砜(DMSO),“肿瘤化疗药物敏感度检测”MTT法试剂为泰伦生物科技(石家庄)有限公司产品(批号041025)。 　　1.1.4 抗癌药物阿霉素(ADM),长春瑞滨(NVB),顺铂(DDP),喜树碱(HCPT),紫杉醇(PTX),5-氟尿嘧啶(5-FU),长春新碱(VCR),足叶乙苷(VP-16),甲氨蝶呤(MTX),丝裂霉素(MMC)。 　　1.2 方法 　　1.2.1 肿瘤单细胞悬液的制备无菌条件下切取直径约1 cm大小的新鲜肿瘤组织,尽量去除脂肪及坏死组织