树突状细胞培养与鉴定.docVIP

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  • 2018-06-04 发布于福建
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树突状细胞培养与鉴定

树突状细胞培养与鉴定    【摘要】 目的 研究利用磁珠分离方法获取单核细胞,用细胞因子GM-CSF和IL-4联合诱导使之分化为树突状细胞(dendritic cells, DCs)的方法,并对培养的细胞从形态,表型,功能等三个方面进行鉴定,从而探索出一套较成熟的DCs的培养方法。方法 通过密度梯度离心的方法获取白细胞悬液中的白膜层,然后通过磁珠分离的方法,收集高纯度的单核细胞。在细胞因子GM-CSF和IL-4的刺激下,将细胞培养至7天左右,收集细胞进行流式分析,并进行淋巴细胞增殖实验,鉴定细胞是否为树突状细胞。 结果 在倒置显微镜下观察,细胞培养第7天,大部分细胞呈单个悬浮,并有明显的毛刺样突起。流式分析发现细胞高表达DC表面特异性抗原CD80,CD86,HLA-DR,并且不再表达单核细胞表面抗原CD14,细胞纯度约为93.12%。淋巴细胞增殖实验显示DCs可明显刺激初始型淋巴细胞增殖。 结论 通过磁珠分离的方法获得单核细胞并利用GM-CSF和IL-4细胞因子诱导可成功培养出纯度高的树突状细胞。    【关键词】 树突状细胞;磁珠;流式   Molecular and functional characteristics of dendritic cells differentiated from highly purified blood monocytes.   

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