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尸体标本防腐方面离子液体的效果研究.doc
尸体标本防腐方面离子液体的效果研究
目前,在医学院校,解剖学尸体标本( 以下简称标本) 是实验教学不可缺少的工具。传统使用甲醛灌注浸泡手段的标本防腐固定技术简单可靠,仍然在实验室中被广泛应用,但标本组织质地及形态由于蛋白凝固、脱水而发生明显皱缩,组织形态发生改变,且使用甲醛也会污染环境,对研究者的健康造成影响[1].也有用不含甲醛的改良尸体保存液的,但在长期保存过程中容易霉变、腐烂。条件好的医学解剖实验室常用冷藏和冷冻的方法保存尸体标本[2].而采用冷藏技术保存的标本由于反复冷冻及复温导致标本变形明显,且标本在实验过程中发生缓慢变质[3].在国外,离子液体已经被应用于人体组织标本的保存。Majewski等[4]首次将离子液体用于组织防腐和固定。国内对离子液体在标本防腐方面的研究近几年来进展很慢。为更好地保存标本和提高资源的利用率及减少福尔马林挥发对身体造成的危害,实验室准备引进由河南林州生产的离子液体来长期保存标本。在使用之前进行对比试验,检测其效果,现报道如下。
1 材料与方法
1. 1材料
三种不同的标本保存液分为三组:A组为离子液体,主要成分是浓度为1%的1 -甲氧基乙基- 3 -甲基咪唑溴盐,产地林州;B组为无甲醛的尸体保存液,产地浙江温州,主要成分防霉防腐剂、乙醇、甘油、50%戊二醛等;C组为5%福尔马林液,产地杭州。将18件装有膝关节标本( 来源教学废旧尸体小型局部膝关节标本,用5%福尔马林液预先处理1年) 玻璃缸( 同样尺寸大小,配有可活动玻璃盖) 放置在同一实验室的标本展览柜内的高度、大小相同的18个格子内。所需组织切片和光学显微观察材料。游标卡尺( 精确度0. 02 mm) 及IQ - 250型甲醛检测仪。
1. 2方法
解剖学实验室内展览柜的18个格子互相独立,并配有可活动的玻璃门。每个玻璃缸的液体量不等,且放置1件膝关节标本,完全浸没在液体中,并封盖。每种保存液有6个玻璃缸。在连续年份的同一时期内开盖检查( 开盖时间2013 - 2015年每年的8月31日) ,过程中不加液体,测量18个格子内的液体挥发情况。目测尸体标本霉变情况和液体颜色,过程持续两年。用IQ - 250型甲醛检测仪检测分析玻璃缸周围5 cm范围内5个点的甲醛含量。取所有标本同一部位组织作切片观察比较。
1. 3统计方法
研究数据采用SPSS19. 0软件进行统计学分析,测出数据以x珋± s来表示。数据差异比较采用t检,以P 2 结果
2. 1三种保存液存储效果比较
三种保存液3个月(2013 - 2015年每年的6 - 8月) 后开盖观察存储效果。
2. 1. 1第一次存储效果观察2013年8月31日第一次观察实验室展览柜内三种液体液面分别下降0. 5 cm,3. 8 cm,2. 3 cm.液体的颜色及标本霉变情况: 离子液体清亮透明,标本未裸露,无霉变; 尸体保存液浑浊、乳白色,裸露部分见1个直径0. 2 cm霉斑;5%福尔马林保存液色质浑浊,裸露部分未见霉斑。
2. 1. 2第二次存储效果观察2014年8月31日第二次开盖检查,实验室内三种液体液面分别下降1. 2 cm,7. 8 cm,7. 2 cm.液体的颜色及标本霉变情况: 离子液体清亮透明,标本未裸露,无霉变; 尸体保存液浑浊、乳白色沉淀,裸露部分见4个直径0. 3 cm霉斑;5%福尔马林保存液色质浑浊、淡黄,裸露部分见2个直径0. 1 cm的霉斑。离子液体长期保存效果明显优于其他两种液体。
2. 1. 3第三次存储效果观察2015年8月31日第三次开盖检查,实验室内三种液体液面分别下降1. 7 cm,14. 5 cm,13. 7 cm.液体的颜色及标本霉变情况: 离子液体清亮透明,标本未裸露,未见霉变; 尸体保存液浑浊、暗红,裸露部分液面被大块霉斑融合覆盖;5%福尔马林保存液色质浑浊、暗黄,裸露部分见直径0. 5 cm霉斑2个。
2. 2 IQ - 250甲醛检测仪测算结果
所测的展览柜内的格子里玻璃缸周围5 cm范围内5个点的三种保存液的甲醛含量值见表1.
2. 3显微镜下结构变化情况
离子液体保存的标本和5%福尔马林保存的标本固定效果较尸体保存液好,而组织切片镜下结构离子液体明显优于5%福尔马林液和尸体保存液保存的标本( 见图1)。
3 讨论
3. 1尸体保存液的现状
尽管5%的福尔马林具有损伤人体呼吸道、降低人体白细胞的毒副作用[5].但是用做尸体标本固定和灌注以及实验室教学标本的保存,目前一直都在使用。多年以来从事人体解剖教学和实验室管理的人员一直致力于找到一种
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