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正常脱落细胞形态特征 目的要求: 1、掌握正常脱落细胞形态特征 2、熟悉常用细胞学染色结果 3、掌握阅片方法和步骤 一、常用细胞学染色结果 1、巴氏染色结果：完全角化的鳞状上皮细胞胞浆呈橘黄色；不完全角化的鳞状上皮细胞胞浆呈粉红色；角化前的鳞状上皮细胞胞浆呈蓝色；上皮细胞核呈紫蓝色，核仁呈红，红细胞染成粉红色。 2、HE染色结果：上皮细胞核呈紫蓝色，核仁呈红色，胞浆染成淡红色，红细胞染成淡红色。 二、阅片方法和步骤 （1）方法：从左至右、自上而下移动推进器 （2）观察各种细胞成分先用低倍镜观察细胞形态→再转到高倍镜观察细胞的形态结构→判断细胞的类型。 正常脱落细胞形态特征 （一）正常复层鳞状上皮细胞 1、底层鳞状上皮细胞：内、外底层鳞状上皮细胞。 2、中层鳞状上皮细胞 3、表层鳞状上皮细胞：角化前鳞状上皮细胞、不完全角化鳞状上皮细胞、完全角鳞状上皮细胞。 内底层鳞状上皮细胞:呈圆形,直径12~15 um,核圆形或椭圆形,直径8~10 um,居中或偏位,核质比为1:0.5~1,核染色质呈细颗粒状,素木素染色呈紫蓝色,巴氏染色胞质成深蓝色或灰蓝色.伊红染色为暗红色. 外底层鳞状上皮细胞:呈圆形,直径15~30 um,细胞核与内底层细胞相似, 核质比为1:1~2,核染色质呈细颗粒状,略疏松,素木素染色呈紫蓝色,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色.伊红染色为暗红色. 中层鳞状上皮细胞:细胞呈多边形、菱形、圆形，直径30~40 um,细胞核相对较小, 核质比为1:2~3,核染色质呈细颗粒状,素木素染色呈紫蓝色,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色.伊红染色为淡红色. 表层角化前鳞状上皮细胞:细胞呈多角形、直径40~406um,细胞核直径为6~8um, 核质比为1:3~5,核染色质呈细颗粒状,深染，素木素染色呈紫蓝色,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色.伊红染色为淡红色 表层不完全角化前鳞状上皮细胞:细胞呈多角形、直径40~406um,细胞核直径约4um, 核质比为1:5,核染色质呈细颗粒状,深染，素木素染色呈紫蓝色,巴氏染色胞质呈淡红色.伊红染色为淡红色 表层完全角化前鳞状上皮细胞:细胞呈多角形、直径40~406um,细胞核消失，巴氏染色胞质呈橘黄色.伊红染色为淡红色 各层细胞伊红染色胞质为红色. 纤毛柱状上皮细胞： 细胞呈圆锥形，顶端宽平，表面有密集的纤毛，染淡红色，细胞底不尖细，细胞核居细胞中底部，直径8~12um，呈卵圆形顺细胞长轴排列，核染色1质细颗粒分布均匀。 正常脱落细胞形态特征 （二）柱状上皮细胞形态特征 （1）纤毛柱状上皮细胞 （2）粘液柱状上皮细胞 （3）储备细胞 粘液柱状上皮细胞： 细胞肥大，呈卵圆、或圆柱圆锥形，细胞核居细胞底部，细胞质丰富，含大量粘液着色透明，核染色质细颗粒分布均匀。 正常脱落的非上皮细胞 储备细胞：细胞体积小，呈圆形、卵圆形或多角形，染色质呈细颗粒状分布均匀，核边清楚，常见核仁。胞质量少，略嗜碱性。 脱落细胞标本制备技术 目的:掌握脱落细胞标本采集和涂片制作、伊红染液染色方法. 脱落细胞标本采集和涂片制作 苏木素-伊红（H-E）染色 1、染色原理:细胞核的核酸带有磷酸根，当染液PH大于2时，核酸带负电荷，能结合染液中带正电荷的碱性染料氧化苏木素矾，而呈紫蓝色。由于天然苏木素的着色力弱，需经碘化钾氧化成氧化苏木素，才具有染色，氧化的苏木素红呈弱酸性，所带的阳离子电荷不强，与含铝金属的媒染剂结合后，可成为带强正电荷的氧化苏木素矾，能与DNA磷酸复合物牢固地结合。染液中的伊红能与细胞质的蛋白质结合，而呈红色。 2、实验标本采集：胸、腹水。 3、器材：玻片、离心机、吸管、染色缸、盖玻片（24x50mm） 4、试剂：伊红染液、苏木素染液、乙醇、稀碱、中性树胶、二甲苯。 （1）苏木素染液：苏木素染料1.18g+碘酸钠0.1g+硫酸铝8.8g+乙二醇125ml+蒸馏水365ml放入1000ml烧杯混匀后，恒们温30度搅拌约2小时，停止后再加10 ml冰醋酸混匀，放入棕色瓶，存放半个月后才使用效果更佳。 （2）稀碱：于100ml蒸馏水中加入1~2饱和碳酸锂 （3）乙醇：95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、50%乙醇 （4）伊红染液：0.5g伊红+100ml蒸馏水 5、涂片制备步骤： 1）将胸或腹水混匀后，取10ml放入离心管离心5分钟. 2)吸去上清液，然后用吸管吸取沉淀物的灰白色细胞层1~2滴（如沉淀物少可将其混匀后再取沉淀物涂片）滴在玻片一端，用滴管前端部分平放于标本后向玻片另一端推移或用玻片推片，使沉淀物分布均匀，厚薄适宜，一般涂片3~4张。 3）涂片固定：涂片干燥时放入95%乙醇固定液固定。 4）固定时间：15~30分钟。 4、涂片的染色操作步骤： （1）核染色：将涂片从固定液中取出，用自来水洗净固定液后，