手性氨基酸的高效毛细管电泳电化学-分离检测研讨.pdfVIP

手性氨基酸的高效毛细管电泳一电化学 分离检测研究 专 业：分析化学 硕士生：张爱华 指导老师：谢天尧副教授 摘要 手性问题涉及到生命的起源以及各种动植物的生存和演化，组成蛋白质的 20种氨基酸(甘氨酸除外)都是L型的，D型和L型氨基酸对映体在生物和生 理活性方面存在很大的差别。因此手性氨基酸的分离是研究生命科学的基础之 一，同时在蛋白质多肽的研究、有机化学中不对称合成以及医药、食品、卫生等 领域都具有很重要的意义。毛细管电泳具有高效、快速、样品用量少和操作简单 等优点，已经成功地应用于氨基酸的手性分离，但是目前所采用的检测方法以光 学检测为主，而大部分氨基酸无光学活性，需进行柱前或柱后衍生化处理才能进 行检测，灵敏度虽高，但操作繁琐且成本较高。而电化学检测则可以弥补光学检 测的一些不足，且具有操作简单，维护方便，样品无须衍生化处理等优点，对于 非衍生化氨基酸的分离检测具有一定的优势。电导检测具有通用性，本论文采用 电导检测的方法，以不同的手性识别试剂拆分了几对未衍生化氨基酸对映体。 的一部分，全文共包括三个部分，主要内容和方法如下： 第一章 在查阅大量文献的基础上，简要概述了毛细管电泳的发展历史；详细介绍了 毛细管电泳分离的原理；概述了毛细管电泳检测的各种方法，特别对于电化学检 测的各种方法及其最新应用进展进行了详细的介绍；比较了毛细管涂层的各种方 法；同时综述了高效毛细管电泳在手性氨基酸分离中的应用，重点介绍了用于拆 分的各种手性试剂；阐明了本课题的研究背景及其意义。 第二章 以未涂层融硅石英毛细管(7511mX50era)为分离柱， 曲2+为手性识别试 了苯丙氨酸、蛋氨酸和亮氨酸三对对映体分离的高效毛细管电泳一电导检测的方 法。重点考察了络合剂的浓度、缓冲溶液的种类、浓度、pH以及分离电压和有 机改性剂等因素对分离的影响，并且以苯丙氨酸为研究的重点对拆分机理进行 了初步的探讨。 第三章 以50p +O．01％四乙烯五胺组成的缓冲溶液中，以BSA为手性选择剂，利用四乙烯五 胺动态涂层的方法减少和抑制BSA在毛细管内壁上的吸附作用，2．5％的异丙醇 作为有机改性剂，利用电导检测的方法，建立了组氨酸对映体初步分离的方法。 重点研究了手性试剂的浓度、缓冲溶液的种类、浓度、pH以及分离电压和有机 添加剂等因素对分离的影响，并且对拆分机理进行了初步的探讨。 关键词：毛细管电泳；非衍生化氨基酸对映体；电导检测；牛血清蛋白； II Chiral andDetectionofAminoAcids Separation byCapillary withElectrochemicalDetector Electrophoresis Chemistry M砌or：Analytical Name：ZhangAihua ProfessorXie Superior：Associate Tiaoyao Abstract isthe of nature andrelatedtothe the Chiralityimporta