4-2011年药物毒理学-动物实验基本知识与技术.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 四、大小鼠常用的给药途径 经口给药： 口服法、喂服法、灌胃法 经呼吸道给药： 吸入法(静式、动式)、气管注入 经皮肤给药： 涂布给药、浸尾给药 注射给药： 腹腔注射、静脉注射、皮下注射 * * （1）喂饲法: 把药物放入饲料或溶于饮水中让动物自动摄取，此法的优点是简单方便，缺点是不能保证剂量准确。一般适用于动物疾病的防治、药物的长期毒性观察，以及制造某些人类疾病的动物模型等。 （2）口服法: 实验者用左手从背部向头部夹紧动物(如豚鼠、兔、犬等)，并用拇指和食指指分别捏紧左、右口角处，让它开口，右手(或助手)用镊子夹住药物送入舌根，关闭嘴唇，让其咽下。 （3）灌胃法：灌胃法是用灌胃器将所应投给动物的药灌到动物胃内，此法剂量准确、操作简便、快速。缺点：对实验动物造成的机械性损伤和心理上的影响；实验人员有被咬伤的危险性。 常用灌胃量：小鼠0.2～lml，大鼠1～4ml，豚鼠1～5ml。 (一)经口染毒 * * 大鼠、小鼠灌胃方法 成年动物插入的深度一般是：小鼠3cm，大鼠或豚鼠5cm，兔约15cm，犬约20cm。 * * (二) 经呼吸道给药法 (1)静式吸入 特点： ①设备简便、容易操作 ②实验条件不稳定 ③只适应于易挥发液态化合物或一定体积的气态化合物测定。 1.吸入给药法 系将实验动物置于一个有一定体积的密闭容器内，加入定量的易挥发液态化合物或一定体积的气态化合物，在容器内形成所需要的受试化合物浓度的空气环境。根据实验所需浓度可用下述公式计算出应加毒物的毫升数。 * * 静式给药的装置 * * 实验动物最低需气量及不同体积染毒装置放置动物数 （注：按接触2小时计算 引自：湖南医科大学卫生学教研室，卫生毒理学试验方法.北京：人民出版社.1971,46） 动物种属 呼吸通气 最低需气量 不同容积染毒柜放置动物数（只） (L/小时) (L/小时) 25L 50L 100L 300L 小鼠 1.45 3.45 3-5 6-10 12-15 36-40 大鼠 10.18 30.50 1 1～2 5～6 15-18 * * (2)动式吸入 动式吸入染毒：由染毒柜、机械通风系统和不断补充受试化合物的配气系统组成。 面罩吸入染毒：用一个特制的面罩密封实验动物的口鼻部分，使之与恒定供应的受试物接触。 两种方式： 特点： ①基本稳定的实验条件 ②适应于各种动物 ③设备较贵 * * 动式染毒装置 * * 动 式 吸 入 染 毒 装 置 * * 面罩式吸入染毒装置 * * 2.气管注入法 在实验动物被麻醉情况下，将已消毒灭菌的受试化合物(粉尘、混悬液或液体)注入气管，使之分布于左、右肺内。 这种方式多用于制造急性中毒模型。 在经呼吸道急性毒性试验时多采用吸入给药法，因为它更接近机体实际接触情况。 * * 为了鉴定化学物经皮肤的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等，均需采用经皮肤染毒。 (三)经皮肤染毒 1.斑贴法（家兔）：斑贴法染毒部位为脊柱两侧的背部皮肤，用脱毛剂脱去被毛，洗净脱毛剂后，放回笼内，至少待24h后才可使用。脱毛过程中应特别注意不要损伤皮肤。次日，仔细检查处理过的皮肤是否有刀伤或过度腐蚀的创口，以及有无炎症，过敏等现象。如有，应暂缓使用，待动物完全恢复。如皮肤准备合乎要求，便可将动物固定好，在脱毛区（2cm2左右）均匀涂布受试物，然后用二层纱布覆盖，再用无刺激性胶带固定，保证受试物与皮肤密切接触，防止实验动物舔食。涂布2～6h后（观察时间视实验需要而定），用温水将皮肤表面仔细洗净，观察皮肤反应。 * * 大、小鼠可采用浸尾方式经尾皮给药，主要目的是定性地判断药物经皮肤的吸收作用。先将动物放人特制的固定盒内，露出尾巴，再将尾巴通过小试管软木塞小孔，插入装有药液或受检液体的试管内，浸泡2-6h，并观察其中毒症状。如果是有毒物，实验时要特别注意，避免实验人员因吸入受检液所形成的有毒蒸气而中毒。为此，要将试管的软木塞塞紧，必要时可将受检液表面加上一层液体石腊。 2.浸尾给药： 小鼠浸尾试验装置 液体 石蜡 * * 1.皮内注射：兔、豚鼠和大鼠的皮内注射部位均为背部脊柱两侧的皮肤。 2.皮下注射：小鼠皮下注射时，通常选用颈背部皮肤。 3.腹腔注射：左手用拇指和食指紧紧抓住颈部背侧的松弛皮肤，手掌成杯状紧握鼠背使得腹部皮肤伸展，同时用小指压住尾根，固定好动物。使小鼠腹部抬高，右手将注射器的针头(5号)刺入皮肤。进针部位是距离下腹部腹中线稍向左或右lmm的位置。针头到达