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第二章 中药化学成分的一般研究方法 中药化学成分类型 生物合成途径 乙酸-丙二酸途径 (acetate-malonate pathway，AA-MA途径) (五)复合途径 提取分离方法 溶剂提取法 CO2超临界流体提取法 水蒸气蒸馏 分离精制方法 萃取法 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱（DCCC） 沉淀法 结晶法 色谱分离法 中药有效成分化学结构的研究方法 旋光光谱(ORD) 圆二色光谱(CD) 1 是利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异实现分离的一类色谱。常用的 包括硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺等 纸层析PC 薄层层析TLC 凝胶层析：用分子筛（依据分子大小不同分离） 活性C层析 聚酰胺层析：分子中 ph-OH 数目分离 高效液相层析 HPLC 是利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异实现分离的一类色谱。常用的 包括硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺等 1硅胶 氧化铝：极性吸附，对极刑物质具有叫强的吸附里，极性强的物质优先被吸附 溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质的吸附能力就越强，反之， 溶质即使被 吸附，但一旦加入极性较强的溶剂时，又可以被后者置换洗脱下来 操作注意：吸附剂的用量一般为试样量的30~60倍，通常以100目，洗脱用的溶剂的极性应逐步增加，跳跃不能太大，在 中，多用混合溶剂，如 苯-乙醚、甲醇-水等 2 是非极性 ，故与硅胶、氧化铝相反，对非极性物质具有较强的亲和能力，在水肿对溶质表现出强的吸附能力，溶剂的记性降低，则活性炭对溶质的吸附能力也随之降低，因此，从活性炭上 时 ，洗脱溶剂的洗脱能力将随溶剂极性 的降低而增强 属于 ，是一种用途十分广泛的分离方法，极性物质和非极性物质均可适用，但特别适合分离酚类、醌类、黄铜类化合物 一般认为是通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成 缔合而产生吸附P29图 显然， 与 等化合物形成氢键的 能力在水中最强，在含水醇中则随着醇浓度的增高而相应减弱，在高能度醇 或其他有机溶剂中几乎不缔合 洗脱能力由弱至强是 是利用分子筛分离物质的一种方法，其所用的载体凝胶是具有多孔隙网状结构的固体物质，如葡聚糖凝胶，是在水中不容、但可膨胀的球形颗粒，具有三维空间的网状结构。当在水中充分膨胀后装入色谱柱中，假如试样混合物，用同一溶剂洗脱时，由于凝胶网孔半径的限制，大分子不能渗入到凝胶颗粒内部，因此在颗粒间隙移动，并随溶剂一起从柱底先流出来，小分子进入到颗粒内部，通过色谱柱时阻力增大、流速变缓，将较晚流出，所以，经过一段时间流动后并叨叨动态平衡后，分子按着由大到小的顺序先后流出并得到分离。 常用的拧叫有 和羟丙基, 只适于在水中应用，而 经 羟丙基化处理后得到的产物，不仅可以在水中使用，也可在极性有机溶剂或它们有水组成的混合溶剂中湿润膨胀后使用 图P25 是 ，他的吸附性是由于范德华引力或氢键的结果，分子筛性是由于本身多孔性结构的性质所决定的 物质在溶剂中的溶解度大，树脂对此物质的吸附力就小，反之。例如，糖是极性的水溶性化合物，与D型非极性树脂吸附作用很弱，据此经常用 将中药的化学成分和糖分离， 主要应用于糖与苷的分离、生物碱的精制 市售 一般喊有未聚合的单体、致孔剂、分散剂、防腐剂等，使用前必须年个个微度处理：以乙醇湿法装柱，继续用乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出的乙醇，当流出的乙醇与水混合不呈现白色乳浊现象即可，然后以大量的蒸馏水洗去乙醇 提取液 过滤 滤液 浓缩 降温 结晶 母液 结晶析出条件： 　　　　1）有效成分浓度高 　　　　2）选择合适的溶剂 　　　　3）温度不同引起溶解度的改变 　　　　4）加速结晶的措施，加晶种 吸附色谱 凝胶过滤色谱 离子交换色谱 大孔树脂色谱 分配色谱 吸附色谱 硅胶 氧化铝：极性吸附 活性炭：非极性吸附 聚酰胺：氢键吸附 (酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基) 水 甲醇 丙酮 氢氧化钠水溶液 甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素水溶液 洗脱能力 弱 强 凝胶过滤色谱（凝胶渗透色谱、分子筛滤过、排阻色谱） 原理：分子筛作用 葡聚糖凝胶（sephadex G） 羟丙基葡聚糖凝胶(sephadex LH-20) 大孔吸附树脂 原理：吸附性和分子筛性原理相结合 吸附性：范德华引力或氢键的 分子筛：