沼泽红假单胞菌rhodopseudomonas palustriscqv97铁载体的初步研究-preliminary study on iron carrier of rhodopseudomonas palustris 97.docxVIP

摘要铁载体在微生物对铁的吸收运输过程中起到了重要的作用，同时其在环境和 疾病治疗方面的作用也成为近年来的研究热点，本文综述了当前微生物铁载体 的研究现状，大多数微生物都能在限铁的生长条件下产生铁载体，然而对不产 氧光合细菌（APB）铁载体的研究很少，对其是否产铁载体也还没定论。基于此， 本论文以筛选到的一株能产生铁载体的不产氧光合细菌—沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）CQV97 作为研究材料，探求铁对 CQV97 菌株生长、光合色素和铁载体合成的调控作用；又进一步通过柱层析对限铁培养菌体 上清中的铁载体进行分离纯化，进一步证明了分离到的铁载体的铁离子运输功 能，以及铁载体对菌体生长和色素合成的影响。主要研究结果如下：R. palustris CQV97 能够产生异羟肟酸型铁载体，未添加 FeCl3 时，铁载体含 量最高，铁载体的产生与生长呈非关联型。随 FeCl3 浓度升高，菌体生长潜伏期 缩短，生长速率、最终生物量以及光合色素（细菌叶绿素 BChl a 和类胡萝卜素 Car）含量均提高，而检测到的游离铁载体含量降低，80 μmol/L FeCl3 时生物量 最高，100 μmol/L 时，Car 和 BChl a 含量达到最高。FeCl3 浓度对 BChl a 的组分 影响不明显，但引起 Car 的主要积累组分由 Spirilloxanthin 转化为 Rhodopin，积 累的 Car 组分的平均共轭体系降低。色素提取液的 Car 特征性光谱出现蓝移现象。AB-8 大孔树脂作为柱层析材料进行铁载体的分离可以有效除去大部分色素 和蛋白杂质，用于对铁载体进行初步分离。铁载体对菌体生长和色素合成具有 重要的调控作用。当环境中未添加铁时，低浓度铁载体使得菌体生长潜伏期缩 短，生长速率和最终生物量以及光合色素（细菌叶绿素 BChl a 和类胡萝卜素 Car） 含量有较明显的提高；而添加高浓度铁载体对菌体生长的促进作用相对减弱。 而当环境中铁充足时（80 μmol/L）时，铁载体对菌体生长影响不大。铁载体对 不同铁浓度培养的菌体所产 BChl a 影响规律相差不大，铁载体浓度升高，BChl aP 相对含量上升，BChl aGG、BChl aDHGG、BChl aTHGG 相对含量下降；而不同铁浓 度培养的菌体所积累的各 Car 组分对铁载体浓度的响应具有明显差异。此外， CQV97 菌株产生的铁载体可被大肠杆菌利用，促进限铁条件下大肠杆菌的生长。 沼泽红假单胞菌 CQV97 能产生异羟肟酸型铁载体，铁和铁载体对 CQV97 菌体 生长和色素合成具有重要的调控作用。关键词：不产氧光合细菌 沼泽红假单胞菌 铁载体 细菌叶绿素 类胡萝卜素AbstractSiderophores play an important role in transfer insoluble iron and maintain the prcess of iron nutrition in the microbe，and its role in environment and deseasestreatment has become a hot issue. This research has summarized the of the siderophore，most microbial can produced siderophore in iron-limited condition, butresearch about siderophore from APB is very limited.Based on this, this research screened a APB strain named Rhodopseudanonas palustris CQV97 which could produce siderophores. Then explore the iron ion on growth, photosynthetic pigments and the regulation of siderophore synthesis. Use the column chromatography to isolation siderophore from the supernatant of limited iron culture solution. And effect of pigments synthesis by siderophore. The results are as follows:Rhodopseudomonas palustris CQV97 was capable of produ