别离生物大分子液相色谱填料的合成和评价.pdfVIP

分离生物大分子液相色谱填料的合成和评价 摘要 色谱是分离分析生物大分子类物质的最主要手段，而液相色谱填料是 实现色谱分离的核心材料，因此具有重要的研究意义。本文主要研究以大 孔硅胶为基质的分离生物大分子液相色谱填料，制各了键合型和聚合型两 类色谱固定相，并对填料的色谱性能进行了考察。得到如下结果： 1牙U用硅胶表面的键合反应制备了键合Ⅺ眄60色谱固定相，以三甲 基氯硅烷为钝化试剂对键合填料进行封端处理，通过将融{560结构中的 环氧结构水解为两个亲水性的醇羟基，制备了亲水性良好的二醇键合色谱 填料。填料装柱后，通过蛋白质分离实验证明该固定相对生物大分子适应 性良好，获得了较好的分离效果，柱子渗透性好，适合生物大分子的高效、 快速分离。 2．制备了两种具有双键结构的键合固定相．键合KH570固定相和键合 乙烯基固定相，并在此基础上利用聚合反应，以过氧化苯甲酰(BP0)为 引发剂，对二乙烯基苯(DⅧ)为交联剂，甲基丙烯酸．2．羟基丙酯为聚 合单体进行聚合反应，制备了硅胶基质聚合物的液相色谱固定相，优化了 反应条件。蛋白质类生物大分子的分离实验证明：填料对生物大分子具有 良好的亲和性和生物适应性，渗透性好，能实现快速、高效的分离，此外 填料在碱性条件下表现出很强的耐受性。 关键词：色谱填料，蛋白质分离，大孔硅胶，高效液相色谱，硅胶固定 相 ABsTRA(-r PREPARATIONAND CHARACTERISTICS0FHPLCSTATIONARY PHASEFORB10SEPI气R栅ON iSdominated Bioseparationp“)cess bychro眦togr印hicsteps．HPLC is useftlliIlHPLC itis to Very importantstudy stationaryphase separation．So I silica HPLC research studied stationaryphase．1nmy mainly Macro—porous 私 mediafor of gelstationaryphaseseparatiIlg s印a枷on proteins． silicaisreac刚witbsilanesfor Macf莎Porollsgel of are stationary stationary phasesprepared；1)Silica-bondedphase；2) bonded Sili∞．baSed—polymerstationaryphase． characteristicsof a陀alsostIldied． stationaryphaSes silicareactedwithsilanesⅪ西60aIldsilicabonded 1．Macr0-por01lsgel is issilica-bondedsilane·KH560 stationaryphase stationaryphase． prepared．1t