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- 2018-06-05 发布于福建
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黄杆菌肝素酶Ⅱ克隆与表达
黄杆菌肝素酶Ⅱ克隆与表达
摘要:目的克隆并表达黄杆菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)的基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增出黄杆菌HepⅡ的基因,经验证后插入到表达质粒pET-28a上构建表达载体,重组质粒转化E.coli BL21(DE3)进行蛋白质表达。结果成功地将PCR扩增得到的测序正确的HepⅡ基因构建入pET-28a载体上,重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达产物经SDS凝胶电泳鉴定得到目的蛋白,测活显示重组HepⅡ具有活性。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepⅡ基因。
关键词:肝素酶Ⅱ;克隆;表达;酶活性
中图分类号:Q55文献标识码:A文章编号:1672-979X(2007)03-0001-04
Cloning and Expression of Flavobacteriun heparinum HeparinaseⅡ
FU Wen-bing,YU Xiao, ZHAO Jian*,FAN Li-qiang, LI Su-xia,YUAN Qin-sheng
(State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China)
Abstract:
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