洛伐他汀的提取工艺PPT.pptxVIP

洛伐他汀的提取工艺研究;提取方法简介;;;洛伐他汀的国际工艺研究现状;Merk公司还报道了110加仑发酵液规模的中试提取精制工艺，如图： ;EP 0033536 A2中特别强调报道了洛伐他汀提取过程中开环物内酯化的方法.菌丝中内酯型的洛伐他汀和菌液中开环酸式的洛伐他汀,分别用乙酸乙酯浸提和萃取.浸提液与萃取液合并,真空蒸馏后,于106e在甲苯中回馏2 h,可使酸式的洛伐他汀转为内酯型.这是由于只有内酯型的洛伐他汀才有商业价值.内酯化后,料液体积已经很小,经硅胶柱层析分离,活性组分浓缩后即可结晶出来.这种方法的弊端在于,需经多步复杂操作,而且某些步骤操作条件过于强烈,洛伐他汀的收率很低,工艺过程中有害溶媒的使用也会带来诸多环境和安全问题。 另有文献报道了更简便易行的闭环方法,并且可以避免苯和甲苯等有害溶媒的使用.文献中提到,发酵液可不经菌丝和菌液分离,直接用乙酸丁酯提取,菌丝和菌液中分别存在开环和闭环形式的洛伐他汀能够被同时提取到丁酯相中.由于乙酸丁酯的沸点高,在浓缩蒸发时可以将水分子带出,且在给定条件下,丁酯不与水形成恒沸混合物,基本上可将洛伐他汀闭环生成的水全部带走,很方便地解决了闭环问题.其工艺见图。 ;文中报道其精粉纯度大于90%.这一工艺最大的特点是尽管菌丝菌液中都存在洛伐他汀,但并不将其分开处理.发酵液酸化后直接加入乙酸丁酯提取,将开环物和闭环物全部转入丁酯相后,在减压浓缩的过程中同时发生开环物的闭环化.这一方法不仅缩短了提取时间,简化了纯化操作,而且避免了提取过程中剧毒溶媒的使用,对劳动者和环境均有益处.文章还预计了这一方法可被工业放大,据估计,其放大时收率可达60%. ;洛伐他汀的国内研究现状;工艺流程： 取洛伐他汀发酵液过滤得湿菌丝，湿菌丝加一定量的乙醇浸提，浸提液加醋酸乙酯萃取，萃取液用醋酸洗后浓缩闭环，冷却结晶，得粗粉；粗粉用甲醇溶解（加热）配成 10%左右的浓度，活性炭脱色，降温结晶,得洛伐他汀成品。中间过程的检测及成品含量的测定均用 HPLC 检测。 色谱条件 色谱柱：Hypersil C18（4.0 mm×150 mm，10 μm）；柱温：室温；流动相：甲醇－0.1%磷酸水 (80∶20 =v/v)，流速 1.0 mL/min；检测波长：238 nm，进样量： 10 μL；洛伐他汀保留时间：7.1 min，理论塔板数大于 1 500。 浸提过程中提的是湿菌丝，所以实验过程中就排除了那些脂溶性的溶剂，直接选用了毒性较小，易回收的乙醇做浸提溶剂； ;单因素实验;目前，洛伐他汀一般通过乙酸丁酯萃取、大孔树脂吸附、解吸附分离纯化、结晶、重结晶精制而得。但此种方法下，洛伐他汀萃取率较低，且工艺烦琐、成本高、利润低，且乙酸丁酯的大量使用也对操作人员的健康有害并污染环境。 本工艺采用超临界CO2流体萃取，95％乙醇超声洗涤纯化，可得到纯度＞98％的洛伐他汀产品。其优势在于摒弃了大量有机溶媒，仅使用乙醇一种溶剂，不会对人体及环境造成危害；工艺简便，省去了结晶与重结晶步骤；降低了成本，适合工业化生产的需求。 萃取工艺优化 超临界CO2萃取洛伐他汀选择无水乙醇为夹带剂，参考文及预试验结果发现萃取压力（A）、萃取温度（B）、夹带剂用量（C，以mL·g－1（原料，即红曲霉菌渣的重量）计）、萃取时间（D）是影响洛伐他汀萃取率的主要因素。 ;由表2可知，各萃取因素产生影响的程度依次为萃取压力＞萃取温度＞萃取时间＞夹带剂用量。由表3可知，因素A即萃取压力对试验结果有显著影响。确定最佳萃取工艺条件为A2B3C2D2，即萃取压力 25 MPa、萃取温度 55 ℃、夹带剂用量2.0 mL·g－1、萃取时间100 min。;纯化工艺优化 洗涤溶剂选择：取洛伐他汀粗品，分别用无水乙醇、95％乙醇、85％乙醇、75％乙醇、65％乙醇（用量均为1 mL·g－1（粗品））进行洗涤，每次超声15 min，过滤，重复4次，50 ℃烘干至恒重，测定其纯度，结果分别为99.01％、98.71％、94.51％、91.15％、79.30％。可见无水乙醇洗涤效果最好，95％乙醇次之，但95％乙醇的价格比无水乙醇低，而且可通过回收得到，综合考虑采用95％乙醇作为洗涤溶剂。 洗涤次数选择：取洛伐他汀粗品，加入95％乙醇（用量为1 mL·g－1（粗品）），超声15 min，选择洗涤次数分别为1、2、3、4、5、6次，过滤，置于50 ℃烘干至恒重，测定其纯度，结果分别为85.94％、92.07％、96.35％、98.87％、99.03％、99.08％。可见，随着洗涤次数的增加，洛伐他汀的纯度增大，而洗涤4次以后洛伐他汀的纯度变化不明显，考虑工艺的操作简便和降低成本，选择洗涤次数为4次。 ;洗涤溶剂用量选择。取洛伐他汀粗品，采用95％乙醇，选择其不同的用量（1、2、