第23章-氧化应激损伤的生物化学诊断PPT.ppt

广东医学院检验学院　刘新光;教学目标与要求 ;目　录 ;第一节 氧化应激的生物化学基础 ;活性氧(reactive oxygen species, ROS ) 如：超氧阴离子( O2 )、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（1O2）、氢过氧化物（ROOH） ;(二)内源性因素;1. O2的产生 ;黄嘌呤氧化酶;2．·OH的产生; 过氧化物酶体中多种需氧脱氢酶催化生成的H2O2，如不迅速被分解，在Fe2+的催化下也可生·OH。 H2O2＋Fe2++H+ 　　 ·OH＋H2O＋Fe3+; 3．吞噬细胞中活性氧的产生 ;4．脂质过氧化作用 (lipid peroxidation);一、氧化应激对机体的生理作用; 合成凝血酶原时，凝血酶原前体的羧化过程需要O2 和CO2反应形成的“活性碳”。; 氨基酸的氧化脱氨作用需自由基的参与； 核糖核苷的还原过程需自由基的参与。; 自由基参与一系列的连锁反应，能引起细胞生物膜上的脂质过氧化，引起细胞损伤。其机制比较复杂，主要有三方面： 膜脂改变导致膜功能的障碍和膜酶的损伤； 脂质过氧化过程中生成的活性氧对酶和其他成分的损伤； LOOH的分解产物特别是醛类产物对细胞及其成分的毒性作用。 ;(一) 氧化应激对脂类和细胞膜的破坏;(二) 氧化应激对蛋白质和酶的损害 ; 脂质过氧化、电离辐射、其他产生的自由基的反应 可通过多种途径影响酶活性: 通过自由基链反应，使酶分子发生聚合； 通过LOOH中的MDA使酶分子发生交联； 通过破坏酶分子中AA以及与酶分子中的金属离子反应。;使DNA链断裂或碱基破坏、缺失，使核酸分子的完整性和构型受到破坏，造成遗传信息改变；;(四) 氧化应激对糖分子的损害 ;一、抗氧化酶类 ;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD);2. 过氧化氢酶(catalase, CAT);3. 硒谷胱甘肽过氧化物酶(selenium dependent glutathione peroxidase, SeGSHPx); 　　如醛酮还原酶，可催化脂肪醛和脂肪醛-谷胱甘肽加成物的还原，以清除脂质过氧化作用的毒性产物。;脂溶性抗氧化剂 水溶性小分子抗氧化剂 蛋白性抗氧化剂 ; 1. 维生素E 清除O2、·OH、脂过氧基 LOO·及1O2，防止脂质过氧化。; VC还可与维生素E自由基 ( VE · )反应，使其恢复为还原型维生素E，而本身变成VC·，后者可由依赖于NADH的氧化还原酶系统还原??VC。VC与VE两者有协同作用。; H2O2＋2GSH ──→ GSSG＋2H2O LOOH＋GSH ──→ GSSG＋LOH＋H2O ·OH＋GSH ──→ H2O＋GS· 2GS· ──→ GSSG;1. 铜蓝蛋白　具有亚铁氧化酶活性，能催化Fe2+氧化成Fe3+，抑制由Fe2+催化H2O2生成·OH的反应，从而防止·OH引发的脂质过氧化作用。;2. 清蛋白结合的胆红素 有效地清除1O2、O2 和LOO·。;3. 其他血浆蛋白;2. 二甲亚砜及甘露醇 　两者均有清除·OH的作用。二甲亚砜近来已用于抗脑水肿。;4. 白细胞功能抑制剂 前列环素(PGI2)是血管内皮细胞产生的花生四烯酸主要代谢物，能抑制血小板聚集，保护冠状动脉。它还能抑制中性粒细胞激活，减少自由基生成。;5. N-乙酰半胱氨酸 它本身是抗氧化剂，而且还是胞内合成GSH的原料。 6. 普罗布可(Probucol) 是一种很强的脂溶性抗氧化剂或自由基清除剂, 该药有延缓泡沫细胞发生的的能力，可用于AS的辅助治疗。 ;一、氧化应激与心血管疾病;自由基和LOOH可引起血管内皮细胞(EC)肿胀和破损，导致动脉硬化发生。 LDL受到自由基作用，形成过氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)，大量沉积于EC，最终形成AS。 Ox-LDL可导致血小板聚集，促使自由基大量产生，从而加速AS发展。;近年研究进展：; (二) 氧化应激与心肌缺血再灌注损伤 ;氧化应激致癌与促癌机制： ;1. 氧化应激对DNA的作用 ; 主要是修饰氨基酸残基，引起结构和构象的改变，造成肽键断裂，聚合和交联，造成细胞选择性生长和改变基因表达。 ; 3. 氧化应激对脂质的作用 ; 4. 基因损伤与致癌、促癌的关系 ; 它是生物体随着增龄而发生的退行性变化的总和，表现为机体功能活动的进行性下降，机体维持内环境恒定和对环境的适应能力逐渐降低。;19