医学课件发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题.ppt

发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题 北京大学医学部研究员 中国生物物理学会光生物学专业委员会副主任委员 国际生物发光和化学发光学会( ISBC）学术理事 Council member of scientific advisory board of International Society on Bioluminescence Chemiluminescence 化学发光（Chemiluminescence） 化学发光的分类 酶促化学发光： 辣根过氧化物酶系统 碱性磷酸酶系统 黄嘌呤氧化酶系统 非酶促化学发光： 吖啶酯系统 草酸酯系统 三价铁-鲁米诺系统 闪光与辉光及其测量方式的差别 免疫测定技术分类 免疫分析结果的干扰因素 化验结果与临床不符的原因 C-肽 小分子性激素测定方法的进展 （消除蛋白结合和类似物/前体/代谢产物的干扰） 国际领先的免疫测定试剂盒 八大类近60个检测项目 是目前小细胞肺癌最敏感最特异的肿瘤标志物之一，阳性率65%-100% NSE水平与小细胞肺癌转移程度相关，与转移的部位无关 治疗前后动态观察血清NSE浓度可以监测小细胞肺癌的治疗效果。 水溶性铁贮存蛋白，具有不同的同工铁蛋白图谱。 酸性同分异构体铁蛋白增高与白血病、肺癌、乳腺癌有关 肝癌时如果AFP测定值较低，可用铁蛋白测定结果作为补充证据 色素沉着旺盛、炎症，尤其是肝炎时，铁蛋白也会升高 神经元特异性烯醇化酶（NSE） 铁蛋白（Frri） 目前国际上强调用等克分子反应的单克隆抗体检测PSA，否则测定值偏高。但美国很多公司甚至大公司的多种PSA试剂盒均未采用等克分子抗体，目前在欧洲已被逐渐排挤出市场。 前列腺特异抗原(PSA) 前列腺癌筛查和治疗后监控 良性前列腺疾病也可升高 女性乳腺癌患者中可检出 FPSA/TPSA值 25% 良性前列腺增生 前列腺癌 0 100% 前列腺癌的特异性标志物，少数几个器官特异性肿瘤标志物之一 地高辛 测定易受地高辛的某些代谢物，以及某些内源性类固醇物质的干扰 取血应在服药10天以后及最后一次服药16小时（出现中毒除外） 0.8 2.0 3.0 4.0 ng/ml 血清浓度 治疗剂量 ＞80%病人心律紊乱 治疗心房纤颤和 心房扑动除外 高度怀疑中毒 注意特征性 心率失常和 心电图改变 必须停药 考虑抢救措施 MoM 正常人群中位数的倍数，即正常人群为1.0MoM 唐氏综合征的实验室诊断 母体血清AFP低于1.0 MoM（0.47-0.86MoM，均值0.65MoM） 母体血清游离β-hCG亚单位孕早期显著高于正常 妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)孕早期显著降低 PAPP-A和游离β-hCG亚单位联合应用 8-14周时检出率62%，假阳性率为5%；孕15-22周检出率为59% 1987年研究，1991年申请化学发光液专利（几乎与国外同步）。 1995年获得上述专利，开始研制单光子计数式发光仪。 1997年研制成功第一代微孔板单光子计数式发光分析仪, 开发出部分发光免疫试剂盒。 2000年获得单光子计数器专利，开始发光免疫检测试剂盒的新药申报。 2003年获医疗器械和药品生产许可证，正式批量生产。 源德的发展历程 自主开发出具有国际水平的发光底物 在国际上率先创立的分程增敏、辅助增敏、坪区延长和干扰屏蔽技术 使发光灵敏度和线性范围均比同类技术提高一个数量级 坪区（信号稳定期）和抗干扰能力也明显提高 因而使试剂盒的稳定性、线性范围超过了国外同类产品 而且还克服了酶促发光固有的工作曲线漂移、低端斜率非线性下降等不足 本底噪音 最低检测限 线性范围 稳定性 （RLU/0.1秒) (HRP pg/样品) (HRP pg/样品) (平均变异系数) 某国外产品 27±3.1 0.1±0.01 0.1--204.8 24.4 自行研制 7±0.9 0.01±0.01 0.01--819.2 5.5 发光液的主要技术性能比较 本公司发光底物 美国某知名公司 发光底物 我们攻克了发光液贮存、抗体玻璃化及标记物稳定剂等相关配套技术，使试剂盒的有效期和稳定性达到了国际水平。 甲状旁腺功能类、肾上腺功能类、贫血类、维生素类、产前筛查、 新生儿疾病筛查、甲型、丙型肝炎类、艾滋病检测… …