抗生素精品课件半合成青霉素和头孢菌素的制备.pptVIP

第八章 半合成青霉素和头孢菌素的制备 胡世文 * 用化学或生物化学等方法改变已知抗生素的化学结构或引入特定的功能基团后，从而获得的具有某种优越性能的新抗生素品种或其衍生物。 半合成抗生素 抗生素药 物的困难 耐药性降低 抗菌谱窄 毒副作用大 对抗生素化学改造主要有：增强抗菌力，扩大抗菌谱，对耐药菌有效，便于吸收和口服，降低毒性和副作用，改善药理性质，提高生物利用度。其中前三点最重要，尤其第三点寻找对耐药菌有效的化合物是今后的主要改造方向。 第一节 概述 第二节 半合成青霉素的制备 以青霉素发酵液中分离得到6-氨基青霉烷酸（6-APA）为基础，用化学或生物化学等方法将各种类型的侧链与6-氨基青霉烷酸缩合，制成的具有耐酸、耐酶或广谱性质的一类抗生素。 方法 一、6-氨基青霉烷酸的合成 无抑茵作用，与各种侧链缩合可得各种半合成抗生素，成为青霉素类抗生素的母核。 6-APA在水中加HCl调pH至3.7~4.0析出白色结晶，熔点208~209℃，等电点4.3，微溶于水，难溶于有机溶剂，遇碱分解，对酸稳定。 1、酶解法制备6-APA （1）生产原理 将大肠杆菌进行深层通气搅拌、二级培养、分离菌体中的亲霉素酰胺酶。在适当的条件下酰胺酶裂解亲霉素分子中的侧链得6-APA和苯乙酸。再将水解液加明矾和乙醇除去蛋白质，用乙酸丁酯分离除去苯乙酸，HCl调节pH值为3.7~4.0即可得到6-APA （2）工艺过程 冷冻管（25 ℃ ，孢子培养，7天） 斜面母瓶（25 ℃ ，孢子培养，7天） 大米孢子（26 ℃ ，种子培养56h，1:1.5vvm） （27 ℃ ，种子培养，24h,1:1.5vvm） 一级种子培养液 发酵液 1）丝状菌三级发酵工艺流程 2）球状菌二级发酵工艺流程 冷冻管（25 ℃ ，孢子培养，6~8天） 亲米（25 ℃ ，孢子培养，8~10天） 生产米（28 ℃，孢子培养，56~60h,1 : 1.5vvm） 培养液（26~25-24 ℃，发酵，7天，1 : 0.8vvm） 发酵液 6-APA产率为85%~90% （3）条件控制 酰胺酶法分解青霉素G为6-APA的温度、pH、时间非常重要，不同的来源的酶分解条件也不相同，所以在用酰胺酶分解青霉素G时要特别注意反应条件的控制一般控制条件为温度38~43 ℃、pH为7.5~7.8、时间为三小时左右。 2、化学裂解法制备6-APA （1）生产原理 青霉素G钾 缩合 PCl3 双青霉素氯化亚磷酸酐 双氯代亚胺 双亚胺醚 6-APA 氯化 PCl5 缩合 正丁醇 水、氨水 水解、中和 ①缩合 配料比：青霉素G钾盐:乙酸乙酯:五氧化二磷:二甲苯胺:三氯化磷=1:3.83: 0.025:0.768:0.277(wt)。 将青霉素的G钾盐的乙酸乙酯溶液冷至-5℃，加入二甲苯胺和五氧化二磷，再降温至-40℃，加三氯化磷，冷至-30℃，反应保温30min。 （2）工艺过程 ②氯化 配料比：缩合液:五氯化磷=1(青霉素G钾盐):0.7(wt)。 将缩合液冷至-40℃，一次加入五氯化磷，在-30℃保温反应75min。 ③醚化 配料比：氯化液:二甲苯胺:正丁醇=1(青霉素G钾盐):0.192:3.4(wt)。 氯化液冷至-65℃，加二甲苯胺，搅拌5min，再加预冷到-60℃的正丁醇，控制料液温度-45℃。加毕，在-45℃保温70min。 ④水解 配料比：醚化液:蒸馏水:15%氨水:丙酮=1(青霉素G钾盐):4:2:0.8(wt)。 在冷冻的醚化液中加入0℃的蒸馏水，控制料液温度在-13℃，水解20min。加氨水(加入一半时加晶种)后，温度控制在13~15℃，加碳酸氢铵调pH至4.1，保温约30min后过滤，用0℃的无水丙酮洗涤，离心。自然干燥，测效价，得6-APA。 二、半合成青霉素的制造方法 用6-APA分子中的氨基与不同前体酸(侧链)发生酰化反应制备半合成青霉素，其方法有两种，即化学法和酶催化法。工业生产上是以化学法为主。 (1) 化学法 ①酰氯法 ②酸酐法 (2) 酶催化法 是利用酰胺酶裂解青霉素成6-APA的逆反应。在pH为5和适宜的温度下，可使6-APA和侧链缩合成相应的新青霉素，但提纯较为复杂，收率也低。 据报道，日本用产碱杆菌固定化菌体进行缩合反应，收率为81%，已达实用阶段。 第三节 半合成头孢菌素的制备 7-氨基头孢酶烷酸(7-ACA) 头孢菌素C（又叫先锋霉素）可由D-alpha-氨基已二酸和7-氨基头孢酶烷酸(7-ACA)缩合而成 孢菌素C抑菌效力低，但具有毒性小、与青霉素很少或没有交叉过敏反应、对稀酸