光镜组织化学样品的制备1PPT.pptVIP

光镜组织化学样品的制备; 切片的制备 取材 固定（组织学和组织化学的主要不同） 冲洗 脱水 透明 透蜡 包埋 切片 染色（组织学和组织化学的主要不同） 封固;取材;取材注意的问题;3、部位准确 对于病变组织要注意： ①???部位必须是主要病变区。 ② 必须取病灶与正常组织的交界区 ③ 必要时取远离病灶的正常组织做对照 4、避免人为因素 刀剪锐利、洁净 快速、准确。 尽量保持生活状态，力争1分钟之内放入固定液，最迟不能超过3分钟。 避免人工损伤。 一刀切取，切取应在蜡板或滤纸上进行，避免拉锯、牵拉或挤压等动作。 ;固定（fixation）;固定的目的：杀死活细胞或活组织，保持组织生前的形态结构，保持结构的化学成分和活性。 1、抑制自溶 2、阻止溶解 3、防止腐败 4、减少损伤 5、硬化组织 6、改变折光率 7、增加媒染作用，便于染色 ;固定的方法;固定的注意事项;固定剂的性质;固定剂的选择;固定后的处理——冲洗;水冲洗：流水冲洗12小时到一昼夜后，注意水流不宜太急，以免冲坏材料 ;脱 水;透 明;二甲苯;如脱水不彻底，用二甲苯透明后，将发生下列不良后果：材料中仍留有微量水分，透明时，二甲苯进不去，因此石蜡也不能透入，切片后将在蜡片中出现空洞，影响效果； 如果组织块在透明时呈白色浑浊不透明状态时，则为脱水不彻底所致。此时应返回重新脱水。 封藏时，会发生乳白色云雾现象，镜下观察，可见许多密集水珠把组织掩盖，切片作废。;注 意;浸蜡和包埋;包埋剂的要求;石 蜡;浸蜡步骤;包 埋;我们可以看到： ①水和酒精可以相溶。 ②酒精和二甲苯相溶。 ③二甲苯和石蜡可以相溶。 因为以上相邻步骤所使用的液体均可以互溶，所以保证每一步骤液体能置换完全。 水和二甲苯不能相溶，乙醇和石蜡不能相溶，所以如果有一个步骤的处理不彻底，残留的液体带到下一个步骤将不能互溶，最终带到渗蜡步骤中，成为细小的空洞，以至不能成为质地致密的石蜡块，也就切不成良好的切???。 ;石蜡切片;仪器及器材准备;切片的贴附;切片过程;切片的注意事项;4蜡片易粘在切片刀上或蜡片皱缩：室温过高或石蜡太软所致，用冷水或冰块冰一下即可。刀的角度过小，也能使切片皱缩。  5蜡片厚薄不一：刀或蜡块没有固定牢，切片机磨损或发生故障。  6蜡片出现裂隙或碎裂：组织浸蜡不足，或浸蜡温度过高，或在透明剂中时间过久，组织已发脆。 7蜡片出现纵裂口：刀有缺口或石蜡内有硬物质如钙盐物质，或刀口不洁。 ;HE染液制备;Schiff试剂 ;钙钴法的碱性磷酸——血涂片;步骤;消毒与取血;推片;染色;谢谢观看