第十三章基因表达的调节.pptVIP

13 基因表达的调节 基因是指一段编码蛋白质多肽链和功能RNA的DNA（某些病毒应为RNA），基因表达就是在基因指导下的蛋白质合成过程。蛋白质是基因表达的产物。生物体含有大量的基因，这些基因在其生命活动过程中并不都是一起开发表达，而是按功能需要，某一特定基因的表达是随时间、环境而变化；不同的基因表达产物在不同的组织、器官分布也不尽相同；另外有些基因在一种组织细胞暂不表达或永不表达，而另一些基因表达情况则可能恰恰相反。这就意味着，随着细胞生长、发育阶段变化，细胞形态、结构与机能不断变化，基因表达的规律呈现一定的时间顺序及空间顺序。 基因也由此可分为两类：一类是管家基因（housekeeping genes）,它的表达产物以恒定的水平始终存在于细胞内；另一类是可调基因(regulated genes)，它的表达产物只有在细胞需要时才表达。 基因表达的调节可以发生在转录水平上，也可以发生在翻译水平上。原核生物的基因组和染色体结构比较简单，转录和翻译可在同一时间和位置上发生，所以原核生物的基因调控主要是转录水平上。真核生物由于存在细胞核的结构分化，转录和翻译过程在时间和空间上被分隔开来，因此真核生物基因表达的调节发生在不同水平上，过程相当复杂。 13.1 原核生物基因表达的调节 1961年Jacob和Monod在对大肠杆菌分解乳糖的酶的基因表达被另一些因子所调节进行研究的基础上，提出了乳糖操纵子模型（lac operon model），很好地解释了原核生物基因表达的调节机制。 13.1.1 操纵子模型 操纵子模型是原核生物基因表达调控的重要方式。所谓操纵子是指原核生物基因组的一个表达调控序列，它包括参与同一代谢途径的几个酶的基因，编码在一起形成一个特殊的转录单位（统称为结构基因），及其前面的调节基因（R）、启动子(P)、操纵基因(O)及其它一些调控序列。结构基因可以产生功能蛋白质；操纵基因的操纵功能是被动的，受到调节基因的调控；调节基因通过它的编码产物——阻遏蛋白与操纵基因相互作用，从而起开启和关闭结构基因的作用。在不同的操纵子中阻遏蛋白的性质不同，这就决定了操纵子有诱导型和阻遏型两种基本类型（图13-1）。 （1）乳糖操纵子 是诱导型操纵子，其特点是诱导物促进操纵子合成诱导酶，从而促进代谢物的分解代谢。它包括依次排列着的启动子、操纵基因和三个结构基因。结构基因lacZ编码分解乳糖的β－半乳糖苷酶，lacY编码吸收乳糖的β－半乳糖苷透性酶，lacA编码β－半乳糖苷乙酰基转移酶。操纵基因lacO不编码任何蛋白质，它是另一个位点上调节基因lacI所编码的阻遏蛋白的结合部位，可阻止附近启动子的起始转录。转录时，RNA聚合酶首先与启动子结合，通过操纵基因，按Z→Y→A顺序依次进行。 当大肠杆菌在以乳糖为唯一碳源培养基上生长时，代谢乳糖的酶便被诱导产生，酶是通过以下调控方式产生的：位于操纵基因之前的调节基因可以转录、翻译而生成阻遏蛋白，这是一种变构蛋白，由4个相同的相对分子量为37 000的亚基聚合而成，每个亚基具有一个诱导剂结合位点及一个辨认操纵基因的结合位点。如果细胞中没有乳糖或其它诱导物时，阻遏蛋白就结合在lacO上，阻止结合在启动子P上的RNA聚合酶向前移动，使转录不能进行，大肠杆菌不能代谢乳糖。当在培养基中只有乳糖或其它诱导物时，它们可和阻遏蛋白上的变构位点相结合，使阻遏蛋白的构象发生变化，破坏了阻遏蛋白与操纵蛋白的亲和力，导致阻遏蛋白不能与操纵子结合，转录得以正常进行，从而分解和吸收乳糖的酶被诱导产生（图13-2）。由于利用乳糖的酶是由乳糖和诱导物（例如：人工合成的异丙基硫代半乳糖苷IPTG）的存在而被诱导产生的，称为诱导酶。在这个过程中阻遏蛋白起的是负调控作用。 在正代谢乳糖的大肠杆菌培养基中加入葡萄糖时，细菌对乳糖的利用迅速下跌。细菌为什么会优先利用葡萄糖，这是由于葡萄糖的降解物引起的。原来在lac操纵子的调控中，还有另外一个蛋白质和环腺苷酸（cAMP）在起作用，这个蛋白质叫分解代谢物基因活化蛋白（CAP），是调节基因之前基因的产物。当CAP与cAMP结合成复合物后被活化，促进RNA聚合酶与启动子的结合，促进转录的进行。没有形成cAMP－CAP复合物的CAP不能与启动子结合，对转录无影响，而只在细胞内有足够的cAMP时，CAP才与cAMP结合，起始转录。葡萄糖分解代谢的降解物可以抑制腺苷酸环化酶的活性，降低细胞内cAMP的含量，使CAP－cAMP复合物解离，CAP脱离启动子，转录终止。这种由于CAP与操纵子的结合而促进转录进行的现象，称为操纵子的正调控机制。 图13-1 诱导型与阻遏型操纵子基本结构模型 当既无cAMP，又无诱导物时，CAP没有和启动子结合，阻遏蛋白阻挡着RNA聚合酶，不出现转录（图13-3 A）；