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猴局部脑缺血模型构建 　　摘要：目的：探讨猴局部脑缺血模型的构建，为脑缺血的相关研究提供合适的动物模型。方法：选择12只健康的猕猴，采用介入造影法，经动脉插管，将微导管插入大脑中动脉（middle　cerebral　artery，MCA）M1分支，使用自体白色血栓堵塞血管，阻断血流。结果：栓塞后数字减影血管造影（DSA）影像提示大脑中动脉分支显示不清，1h内CT灌注成像（CT　Perfusion　imaging，CTPI）和扩散加权成像（diffusion-weighted　imaging，DWI）可见急性局部脑缺血病灶。结论：用自体白色血栓介入法可建立稳定的猴局部脑缺血模型，对研究脑缺血疾病有重要的临床价值。 　　关键词：局部脑缺血；猴；大脑中动脉；动物模型 　　中图分类号：R743.3；Q95.33　文献标志码：A　文章编号：1008-2409（2012）05-0663-04 　　脑血管病是危害人类健康和生命的常见病和多发病，与癌症、冠心病并称为危害人类健康的三大疾病之一。缺血性脑血管病（ischemia　cerebrovasculardisease，ICVD）约占全部脑血管病的80％，且脑血管病的85％是由大脑中动脉栓塞引起。脑缺血动物模型是研究脑血管疾病机制和防治必不可少的材料。本研究拟构建猴局部脑缺血动物模型，为探究脑血管病的病理生理学机制、筛选有效的药物、评价影像质量及寻找最佳的治疗方法奠定基础。 　　1.材料和方法 　　1.1材料 　　1.1.1实验动物　广西雄性猕猴12只（桂林永福动物实验养殖基地），体重5～8kg，年龄4～8岁。动物筛选：术前行64排螺旋CT平扫，排除颅内病变。 　　1.1.2实验药品和试剂　麻醉药、对比剂、肝素、凝固酶、减轻脑水肿药物以及利尿剂。 　　1.1.3仪器设备　美国GE公司64排螺旋CT（GE　LightSpeed　VCT／XT），德国Siemens　1.5T超导磁共振，Phillip公司INTEGRIS　CV　DSA系统，双筒高压注射器，美国Intramedic公司PE-50管，CT后处理工作站（Advantage　Workstation　4.4，GEMedical　Systems），MRI后处理Synogo工作站等。 　　1.2方法 　　1.2.1麻醉及术前准备　术前24h禁食，8h禁水。麻醉前，平静状态下记录猴子呼吸频率。复合麻醉剂（氯胺酮10mg／kg+咪达唑仑1mg／kg+东莨菪碱0.02mg／kg）肌肉注射，麻醉成功后，行手术前CT平扫，排除颅内病变，有病变者不予手术。 ???　开通静脉通道：动物仰卧位固定于手术台上，左小腿外侧静脉区常规备皮、消毒，静脉穿刺成功后接三通管，以备术中静脉给药取血之用。 　　1.2.2制作血栓　动物麻醉后取其静脉血2ml，肝素抗凝，高速离心后取上层血清加入血浆凝固酶，注入直径1mm的硬膜外麻醉管（河南新乡市驼人医疗器械公司），制成自体血栓备用。 　　1.2.3大脑中动脉部分栓塞　动物麻醉后鼻饲给氧，在常规心电监护仪系统下进行心电、呼吸和血压监护。微量泵静脉注射异丙酚等以维持麻醉状态。皮肤切开后行Seldinger技术将1.4F微导管插管至大脑中动脉起始部（M1段），行大脑中动脉正侧位造影，总量1.8ml，速度0.8ml／s，了解右侧大脑中动脉血流状态。自微导管注入制备好的血栓，再次行大脑中动脉正侧位造影确认栓塞成功。插管技术和方法与周智鹏等报道相同。 　　1.2.4CTPI扫描　分别于栓塞后1h行CTPI扫描，扫描条件120KV，80mA，对比剂总量10ml，速度0.3ml／s。将扫描得到的数据导人GE　AW4.4工作站，经Perfusion软件处理得到脑血流量（cerebral　blood　flow，CBF）、脑血流容积（cerebral　blood　volume，CBV）和平均通过时间（mean　transit　time，MTT）等数据。 　　1.2.5MRI和DWI扫描 　　术后1h内分别行MRI和DWI扫描。MRI　T2WI采用快速自旋回波，扫描条件TR／TE：4100ms／100ms，FOV180mm，扫描层数16层，层厚3mm；T1WI采用自旋回波，扫描条件TR／TE：500ms／8.3ms，FOV180mm，扫描层数16层，层厚3mm。DWI检查采用单次激发自旋回波，回波平面成像序列扫描，并应用联合并行采集技术，其具体参数：TR／TE：3500ms／103ms，b=1000s／mm2，激励次数4，FOV222mm，矩阵128×128，扫描层数16层，层厚3mm。 　　2.结果 　　经自体白色血栓致MCAO造模后，血栓牢固，梗死灶形成，12只猕猴均呈现不同程度右侧或左侧肢体瘫痪的大脑局灶性