07实验七 细胞骨架的观察(考马斯亮兰R250染植物细胞的微丝)njPPT.pptVIP

实验七细胞骨架的观察 考马斯亮兰R250染植物细胞的微丝 一、实验目的 掌握观察植物细胞内微丝的方法。 了解观察动物细胞内微丝的方法。 二、实验原理 细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网格结构，按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。 光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1％Triton X-100处理细胞，可使细胞膜溶解，而细胞骨架系统的蛋白质被保存，再用考马斯亮兰R250染色，使得细胞质中细胞骨架得以清晰可见。 细胞骨架 微管 微丝 中等纤维 三、材料和试剂 材料：新鲜洋葱鳞茎 器材：光学显微镜、天平、吸管、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、剪刀、表面皿、染色缸 试剂： 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（ pH6.8）, 1％ Triton X-100（用M-缓冲液配制）， M-缓冲液， 3%戊二醛（用0.2mol/L磷酸盐缓冲液配制）， 磷酸缓冲盐溶液（PBS，pH6.8）， 0.2％考马斯亮兰R250 实验的关键： Triton X-100 抽提处理的时间很关键，如果处理时间太短，没有抽提掉细胞器膜上的蛋白，会造成很深的背景颜色，干扰