12 基因诊断-10学习班PPT.ppt

第十二章基因诊断Gene Diagnosis;基因诊断之父—简悦威; 第一节 基因诊断的技术和方法 第二节 遗传病的基因诊断 第三节 传染病的基因诊断 第四节 肿瘤的基因诊断 第五节 基因诊断法医学上应用;第一节 基因诊断的技术和方法（以遗传病诊断为例）;遗传物质改变(诊断依据)： 一是基因或表达产物水平变化，如病毒基因及其转录产物在体内从无到有、癌基因表达水平从低到高等； 二是基因结构变化即突变，如点突变引起基因失活、染色体转位引起基因异常激活或灭活等。;二、基因诊断的常用技术及应用举例;核酸分子杂交流程;1. Southern印迹杂交 提取DNA→ 限制性内切酶消化DNA以产生特定长度的片段→凝胶电泳分离 →变性处理→DNA转印到膜上并使其牢固结合→将标记的探针与膜上DNA片段杂交，分析杂交信号。 ;2. Northern印迹杂交 用于RNA的检测，能对组织细胞中总RNA或mRNA进行定性和定量分析。 步骤：RNA经变性凝胶电泳后，将其转移到固相支持物上，以便用杂交反应检测特定的mRNA分子的含量与大小。;3. 斑点杂交;正常的（N）的： 5′-ACT CCT GAG GAG AAG TCT GC-3′ 突变的（M）的： 5′-ACT CCT GTG GAG AAG TCT GC-3′ ;正常的（N）的ASO