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紫外可见分光光度法模块之
紫外分光光度法的应用
教学任务
p 紫外分光光度法对蒽醌的定性分析。
p 使用紫外分光光度计,运用工作曲线法测定粗品蒽醌的纯度。
教学方法
p 讲练结合法
学时
p 每 20 人一个学习组,一人一台紫外可见分光光度计,整个任务需 6 学时。
教学设计
提 出任务—— 如何采用紫外分光光度法对物质进行定性分析?
教师引导 ,学生讨论,制定合理 的定性分析方案
学生实验 ,绘制紫外吸收光谱图
讨论 ,讲解紫外吸收光谱 图的相关知识
提 出任务 :如何测定粗 品蒽醌的纯度?
学生讨论 ,教师引导,制定合理 的定量分析方案
学生实验 ,数据处理, 总结讨论
课后思考 ,提出新任务
课程引入
p 如何采用紫外分光光度法对物质进行定性分析?
p 不同的有机化合物具有不同的吸收光谱,因此根据化合物的紫外吸收光谱中特征吸
收峰的波长和强度可以进行物质的鉴别和纯度的检查。
问题:如何实现对未知物是否为蒽醌进行初步定性分析?
学生设计方案,绘制未知样品的紫外吸收光谱。
p 学生将样品溶解在甲醇中,配溶液,以甲醇作参比,在 200nm380nm 波段,每隔
10nm测定一次吸光度,在 251nm和 323nm 附近每隔 2nm测定一次,绘制吸收曲线。
* *
p 因为蒽醌能产生π→ π 跃迁和 n→π 跃迁,在 λ251nm 处有强吸收,其 ε=45820,在
λ323nm 处还有一中强吸收,其ε=4700。将实验测得的谱图和标准谱图进行比较、分
析。
p 未知试样的定性鉴定:
1 采用比较光谱法。(将经提纯后的样品和标准物用相同的溶剂配成溶液,并在相同条
件下,绘制吸收光谱曲线,比较其吸收光谱是否一致。主要从曲线形状、 λ 、 λ 、吸
max min
收峰数目、拐点及εmax、判断)
2 如果没有标准物,也可通过检索 Sadtler 紫外标准图谱来比较。
p 推测化合物的分子结构:紫外吸收光谱在研究化合物结构中的主要作用是推测官能
团、结构中的共扼关系和共扼关系中取代基位置、种类和数目。
p 推测化合物的共扼体系、部分骨架
p 区分化合物的构型
p 互变异构体的鉴别
p 化合物纯度的检测:
p 紫外吸收光谱能检查化合物中是否含有具有紫外吸收的杂质。(例如检查乙醇中的杂
质苯,由于苯在 256nm处有吸收,而乙醇在此波长下无吸收。)
p 请同学们比较可见分光光度法和紫外分光光度法的区别?
可见分光光度法 紫外分光光度法
定义 基于物质对可见光的吸收而对物质进行 基于物质对紫外光的吸收而对物质进行
定性和定量分析的一类方法 定性和定量分析的一类方法
产生 价电子能级的跃迁 价电子能级的跃迁
光源 钨灯或卤钨灯 氘灯
吸收池 玻璃吸收池 石英吸收池
条件 绘制吸收曲线,选择工作波长; 绘制吸收曲线,选择工作波长;参比溶液
显色条件,参比溶液。
应用 一般作定量分析 定性和定量分析
p 紫外分光光度法
p 定义:基于物质对紫外光的选择性吸收来进行分析测试的方法。产生原因:分子中
价电子能级的跃迁产生的
p 紫外吸收光谱曲线
p 即用一束具有连续波长的紫外光照射一定浓度的样品溶液,分别测量不同波长下溶
液的吸光度,以吸光度对波长作图
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