生命活动的主要承担者蛋白质课件2.pptxVIP

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生命活动的主要承担者蛋白质课件2

微量元素百分率(%) 微量元素百分率(%)Fe0~0.8S0.23~2.4Cu IZn P0~0.8Mn三、蛋白质的特征元素---氮 含氮量较恒定,一般在16%左右 蛋白质系数——6.25 蛋白质含量 = 样品含氮量?6.25COOH|H2N C H|R第二节 蛋白质的基本结构单位----氨基酸基本氨基酸蛋白氨基酸稀有氨基酸氨基酸非蛋白氨基酸(二百余种)一、结构特点与分类1. 结构特点:所有20 种基本氨基酸的结构通式特点:?-氨基酸 (脯氨酸除外) L-氨基酸(甘氨酸除外)表示:中文:如 丙氨酸;英文:三字母符号(Ala)和单字母符号(A) 2.分类 根据各氨基酸R基的带电性 将20种氨基酸共分为四组: 非极性R基氨基酸 极性不带电荷R基氨基酸 带负电荷R基氨基酸 (酸性氨基酸) 带正电荷R基氨基酸(碱性氨基酸)3. 稀有氨基酸:蛋白质合成后经加工修饰而生成的氨基酸。4—羟基脯氨酸赖氨酸5—羟基赖氨酸二、必需氨基酸(8种): 人体不能自我合成,必须从外界中摄取的氨基酸赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、色氨酸结构式三字母 符号 Ala Val Leu Ile Phe Trp Met Pro单字母符号 A V L I F W M P氨基酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸苯丙氨酸色氨酸甲硫氨酸脯氨酸非 极 性R基 氨 基 酸 H—CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?结构式氨基酸甘氨酸丝氨酸苏氨酸半胱氨酸酪氨酸天冬酰胺谷氨酰胺三字母 符号 Gly Ser Thr Gys Tyr Asn Gln单字母 符号 G S T C Y N Q|||||||NH3?NH3?NH3?NH3?NH3?NH3?NH3? 极 性 不 带 电 荷 R基 氨 基 酸 HO—CH2—HO—CH— |CH3HS—CH2—NH2—CO—CH2—HO——CH2—NH2—CO—CH2—CH2—CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?CH—COO?|||||酸 性 R 基 氨 基 酸 氨基酸天冬氨酸谷氨酸NH3?NH3?NH3?NH3?NH3?结构式三字母 符号 Asp Glu单字母 符号 D E K R H碱性R 基氨基酸 赖氨酸精氨酸组氨酸 Lys Arg HIs—CH2—+–OOC—CH2—–OOC—CH2—CH2—HNNHNH2—C—NH—CH2—CH2—CH2—NH3?—CH2—CH2—CH2—CH2—||NH2?酸 碱 R–R+R±三、氨基酸的理化性质1.一般性质:溶解度:可溶于水、稀酸、稀碱中 旋光性:丙氨酸 +1.8、半胱氨酸 -16.5、 脯氨酸 -86.0 熔点:大部分在200℃以上,丙氨酸297、丝氨酸2802.两性解离和等电点:氨基酸由酸性基团和碱性基团,可以发生两性解离:等电点定义:某一氨基酸的净电荷等于零时的溶液pH值为该氨基酸的等电点不同的氨基酸有不同的等电点等电点时的特点:溶解度下降用途:可根据氨基酸的等电点来分离不同氨基酸,如味精生产时将pH值调到3.22,谷氨酸沉淀下来。酸 碱 pI 计算法: pI=(pK左′+pK右′ )/2 pK左′ : pI处左侧pK ′值, pK右′ :pI处右侧pK ′值。 如:甘氨酸的两性解离为:pK1 ′ =2.34 pk2 ′ =9.60pI=(2.34+9.60)/2=5.97赖氨酸的两性解离为:与等电点有关的pK值为:pK2 ′ =8.95 pK3 ′ =10.53 pI=9.74 一、二、三组氨基酸:pI=(pK1′+pK2 ′ )/2 第四组氨基酸:pI=(pK2 ′ +pK3 ′ )/2吸收光谱 所有20种基本氨基酸在可见光区都无光吸收,在近紫外区三种芳香氨基酸具有紫外吸收,即: 苯丙氨酸—257nm 酪氨酸—275nm 色氨酸—280nm氨基酸表观解离常数和等电点还原茚三酮氨基酸水合茚三酮产物(蓝紫色,?m = 570nm )4. 氨基酸的重要化学反应 (1)茚三酮反应 用途:可用于氨基酸的定性和定量测定 脯氨酸是亚氨基酸,只有一步反应,反应产物为黄色。室温二硝基氟苯氨基酸DNP—氨基酸(黄色)(2)Sanger反应 氨基酸与二硝基氟苯(DNFB)反应,生成二硝基苯代氨基酸(DNP—氨基酸)用途:测定肽链N-端氨基酸弱碱异硫氰酸苯脂(PITC)PTC—氨基酸PTH—氨基酸(3)Edman反应 异硫氰酸苯酯与氨基酸反应生成PTH—氨基酸用途:蛋白质一级结构序列测定洗脱液+++被交换离子样品1样品2 5. 氨基酸的分离方法 离子交换层析配对离子离子交换剂氨基酸平衡离子C 端N 端肽单位肽单位第三节 肽

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