4生物信息的传递(下)--从mRNA到蛋白质PPT.ppt

糖蛋白主要是蛋白质侧链上的天冬氨酸、丝氨酸、苏氨酸残基加上糖基形成的； 胶原蛋白上的脯氨酸和赖氨酸多数是羟基化的。 实验证明，内质网可能是蛋白质N-糖基化的主要场所。 前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图 4、切除新生肽链中非功能片段 蜂毒蛋白只有经蛋白酶水解切除N-端的22个氨基酸以后才有生物活性。该胞外蛋白酶只能特异性切割X-Y2肽，其中X是丙氨酸，天门冬氨酸和谷氨酸，Y是丙氨酸或脯氨酸。 蛋白质的折叠 由核糖体合成的新生肽链必须通过正确的折叠才能形成动力学和热力学稳定的三维构象，表现生物学活性或功能。 单链多肽蛋白质三级结构具有活性； 寡聚蛋白要组装成四级结构，才有活性和功能。 至少有两类蛋白质参与体内蛋白质的折叠过程，加速蛋白质折叠过程 酶： 蛋白质二硫键异构酶：加速蛋白质正确二硫键的形成 肽酰脯氨酰顺反异构酶：催化肽脯氨酰之间的肽键的旋转反应。多肽链中肽酰-脯氨酸间的肽键有顺反两种异构体，空间构象明显差别。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 分子伴侣： 在细胞内帮助新生肽链正确组装，成为成熟蛋白质，而本身不是最终功能蛋白质的组成成分的分子。 细胞内至少有二类分子伴侣家族 热休克蛋白：包括HSP70、HSP40、GrpE三个家族，广泛存在于原核及真核细胞中。三者协同作用，促使某些自发折叠的蛋白质正确折叠。 伴侣素：包括HSP60、HSP10，主要为非自发折叠蛋白提供能折叠形成天然结构的微环境。 分子伴侣在新生肽链折叠中主要通过防止或消除肽链的错误折叠，增加功能性蛋白质折叠产率来发挥作用。 (一)氨基酸的活化 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP＋PPi 氨酰-tRNA合成酶 一般每种氨酰-tRNA合成酶对一种氨基酸专一，但可以和该种氨基酸的多个同工tRNA结合 反应分两步进行 第一步反应 氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ PPi 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E tRNA与酶结合的模型 tRNA 氨酰-tRNA合成酶 ATP 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity)。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 原核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 真核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 甲酰甲硫氨酸 fMet-tRNAfMet 甲硫氨酸 Met-tRNAMet (二)翻译的起始 原核生物（细菌）为例： 所需成分： 30S小亚基、 50S大亚基、模板mRNA、 fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+ 翻译起始因子：IF-1、IF-2、IF-3 一般，特定的mRNA的翻译效率受起始速度所决定。 IF-3 IF-1 翻译起始(翻译起始复合物形成)又可被分成几步： 1. 核糖体大小亚基分离 2、30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 S-D序列 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3.在IF-2和GTP的帮助下，fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 A U G 5 3 真核生物翻译起始的特点 核糖体较大,为８０Ｓ； 起始因子比较多； mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 Met-tRNAMet mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物； 真核生物翻译起始复合物形成(区别原核生物) 原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物。 真核生物翻译起始复合物的形成 met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PA