原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
PCR的经验与教训PPT
PCR的经验总结;内容提要：;PCR的简介：;PCR的简介：;PCR的原理：;标准的PCR反应体系;PCR的反应流程：;延伸温度与时间：;PCR的结果分析;PCR常见问题与对策;问题一：;问题二：无扩增产物;问题三：PCR 产物量过少;问题四：非特异性扩增;问题五：拖尾;问题六：杂带;问题七：扩增产物在凝胶呈弥散状;问题八：假阳性;相关PCR技术;RT-PCR;RT-PCR一般步骤：;测RNA浓度;反转录：
在微量离心管中加入模板RNA 2ug，Olig(dT)18(0.1ug/ul) 5ul，10mmol/L dNTP 2ul，DEPC水补足体积至14ul，65℃水浴5min，立即放到冰上，顺序依次如下：
5*M-MLV反应缓冲液 4ul
核酸酶抑制剂（25U/ul） 1ul
M-MLV反转录酶（100U/ul） 1ul
37℃孵育60min
PCR反应：
反转录产物（模板） 2ul
10*PCR反应缓冲液 5ul
10mmol/L dNTP 4ul
引物（50umol/L） 1ul
Taq酶（50U/ul） 0.5ul
DEPC水 37.5u;设置扩增程序：;qRT-PCR;TaqMan法;TaqMan法反应体系：;设置程序： PCR 反应条件如下：;SYBR Green 1法;SYBR Green法反应体系：;设置程序： PCR 反应条件如下：;TaqMan法与SYBR Green 1法的比较;定量与普通PCR的差别;PCR的小技巧;实验室现有的PCR仪; 细节决定成败 公用平台的维护，人人有责
文档评论（0）