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专题二 克隆技术 无性繁殖与克隆 分子水平上的克隆 细胞水平上的克隆 克隆技术的发展 克隆的条件 第一节 什么是克隆 基因克隆 细胞克隆 植物细胞工程 细胞全能性高低的比较 番茄与马铃薯同属茄科植物，但不是同属的植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯的块茎生长在土壤中。 人们曾经有这样一个幻想：让一株植株地上部分结番茄，地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗？ 第二节 植物的克隆（植物细胞工程） 细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 根据操作对象不同，可以分为： 植物细胞工程和动物细胞工程 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、差异： （1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 一、植物细胞的全能性 受精卵 生殖细胞 体细胞 ＞ ＞ 4、大小 切取 接种 愈伤组织的形成 试管苗的形成 培养室 移栽 此操作过程需要注意什么事项？ 关键词： 脱分化、再分化、愈伤组织 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官，常用根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等 几个概念： 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 细胞表现出全能性的条件 离体 培养基成分：一定营养物质、激素 无菌 人为控制：人工条件 环境条件： 为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 脱分化避光、再分化需光、适宜的PH值和充足的氧气 植物组织培养的培养基 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质 无机营养成分：水和无机盐 有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 生长激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 PH值：5.0－6.0 试管苗大规模培养 过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素 再分化 植物组织培养 植物组织培养条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 例题：某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答： (1）图中①表示的是该花粉培养过程中的??????????????过程，②表示的是???????????过程，X代表的是????????????????，③表示的是??????????????过程，④表示的是诱导??????????????过程。 （2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中???????????????的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为????????????????????植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有????????????????????。 答案： （1）脱分化??再分化???胚状体???分化（或发育）???生根 （2）激素???单倍体???细胞全能性 1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。 1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种——“Potamato”。 二、植物体细胞杂交 1、定义： 用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 2、优势：（与有性杂交方法比较） 打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇（PEG) 再生细胞