动物细胞的体外培养PPT.pptVIP

;;(1)无菌条件：风淋室、超净台、干燥除菌设备、低温冰箱等。 (2)细胞生长条件：纯水蒸馏器、纯水仪、CO2孵箱、培养器皿等。 ; 风淋室;纯水仪;;氨基酸（必需氨基酸） 谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。;碳水化合物 细胞生长的主要 能量来源其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。;抗生素 常用为青霉素和链霉素、两性霉素，以抑制革兰氏阴性菌和阳性菌的污染。 ;三.培养基的物理性质;粘度 粘度对细胞生长影响较少，但在细胞培养或用胰蛋白酶处理时，为尽量减少细胞损伤 ，可通过提高培养液粘度来克服。加羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮 来增加粘度。 表面张力和泡沫 表面张力有利于培养物粘着于底物上面。在悬浮培养中，减少泡沫的产生，加防泡沫硅。 渗透压 细胞必须生活在等渗环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定耐受性。;一、细胞原代培养;原代培养6天后的大鼠神经元;1.组织解离：;原代细胞培养的方法;(1)外植块培养：外植块在一定限度内可保持其原有组织结构，有利于其适应体外培养环境。短期培养的外植块成为细胞培养的材料来源之一。 ;在动物培养中，一经贴壁就迅速铺展并开始有丝分裂，逐渐形成致密的细胞单层。 优点： ①更换新鲜培养液比较容易。一般1-3天换液一次，细胞长成单层后进