基因操作及其医学应用PPT.ppt

3．重组DNA的转化与增殖 制备 Competence Cell． C．Cell--?R.DNA——”Hot shock”(42℃，2’) ——L．B．Culture--37℃，lhr． --LB．agar．plate -- genomic library． 基因操作的基本内容和程序 基因操作的基本战略 基因操作的基本内容和程序 4. 阳性重组体的筛选 ② 颜色反应 　Lac+Polylinker+β-半乳糖苷酶 　　　Xgal 　　　　　蓝色/白色 基因操作的基本战略 利用 基因操作的基本内容和程序 基因操作的基本战略 4. 阳性重组体的筛选 　　 ① 抗药基因 　　　　　抗Ampicilin基因 　　　　 　Ampicilin敏感受体细胞 　　　　　　　　＋ 　　　　　　Ampicilin 培养基 　　　　　　　　↓ 　　　　　未转化菌落不能存活 基因操作的基本内容和程序 4. 阳性重组体的筛选 ② 颜色反应 　Lac+Polylinker+β-半乳糖苷酶 　　　Xgal 　　　　　蓝色/白色 基因操作的基本战略 利用 基因操作的基本内容和程序 4. 阳性重组体的筛选 　③ 影印原位杂交（Situ Hybridization) 　　　菌落ＤＮＡ 　　　　 　　　硝酸纤维滤膜 　　　阳性重组体 基因操作的基本战略 原位固定 重组探针杂交 基因操作