孙甸甸 棉铃虫的羧酸酯酶基因cDNA的克隆、PPT.pptxVIP

棉铃虫的羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及活性分析;目录;前言;1.1 材料 ：棉铃虫、棉铃虫中肠cDNA表达文库 1.2 菌株与质粒：大肠杆 XL1-Blue MRF’，SOLR，BL21；pET21b 表达载体 1.3 主要培养基：LB培养基；NZY培养基 1.4 试剂：棉铃虫围食膜多克隆抗体，由河北省生物研究所制备； QIAquick Gel Extraction Kit，购QIAGEN 公司； Ta Ka Ra DNA Fragment Purification Kit Ver.2.0，购自宝生物工程（大连）有限公司； T4 DNA Ligase，购自宝生物工程（大连）有限公司；NBT、BCIP，购自上海生工生物工程有限公司； anti-rabbit Ig G（Sigma），购自博士德生物工程有限公司。 ;2.方法; 制备感受态细胞E.coli BL21，将连接产物进行转化 随机挑选克隆，培养、保存 提取重组质粒 DNA XhoⅠ单酶切，NotⅠ、Xho双酶切分别验证 12 ; 2.3 HC3重组蛋白的表达;2.4 HC3 羧酸酯酶活力的测定 ;3.结果与分析;经 NCBI 网站 Conserved Domain Database（CDD）分析