抗体酶在酶活性改造中的应用PPT.ppt

抗体酶在酶活性改造中的应用 老师：周华 主讲：焦朋飞 主要内容 抗体酶简介 抗体酶的制备 抗体酶在酶活性改造中的应用 抗体酶 概念：抗体酶或催化抗体（Catalytic antibody)是一种新型人工酶制剂，是一种具有催化功能的抗体分子，在其可变区赋予了酶的属性。它是利用现代生物学与化学的理论与技术交叉研究的成果，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物。 抗体酶模型 抗体酶的制备 抗体酶制备的基本原理 免疫反应和酶反应十分相似，抗体能专一地、高亲和力地与抗原物质结合，然后再促使抗原发生各种变化。如果能适当地改变抗体中与抗原结合部位的微环境，并在适当部位引入相应的催化基团，那就有可能使抗体转变为具有催化性能的抗体酶。 1.诱导法 2.基因工程法 对于已经获得的单抗，分析其氨基酸序列和相应基因的碱基序列，将抗原结合部位的基因换上编码有催化作用的氨基酸的基因 3.拷贝法（二次免疫法） 用已知的酶作为抗原免疫动物，得到抗酶抗体，让后再将此抗体作为抗原去免疫动物，经筛选和纯化就可获得具有原来酶活性的抗体 4.化学修饰法 抗体酶和酶一样也可以用化学修饰的方法加以改造。对抗体酶进行结构修饰的关键是找到一种温和的方法，在抗体结合位置或附近引入具有催化功能的基团。 游离巯基就是适合的基团之一,它具有高亲核性,易于氧化,及能通过二硫化物进行交换反应或亲电反应而选择性修饰的特点。 抗体酶的应用 1.在有机合成领域的应用 有机反应机理比较复杂，副反应多，产率不高，原子经济性不好，抗体酶的应用可以大大改观这一现象，它可以选择性的催化平行反应中的某一反应，从而大大增加产率。抗体酶同时可使苛刻条件下的化学反应在温和条件下进行。 抗体酶的应用 2.用于肿瘤治疗 目前正在发展一种称为抗体介导前药治疗技术，即将能水解前药释放出肿瘤细胞毒剂的酶和肿瘤专一性抗体相偶联，这样酶就会通过和肿瘤结合的抗体而存在于细胞的表面。 抗体酶的应用 静脉给药后，当药物扩散至肿瘤细胞的表面或附近，抗体酶就会将前药迅速水解释放出抗肿瘤药物，从而提高肿瘤细胞局部药物浓度，增强对肿瘤的杀伤力，达到提高肿瘤化疗效果的目的。 当然前药只能被抗体酶水解而不能被内源性酶水解，抗原还要尽量减少免疫原性。 抗体酶的应用 抗体酶的应用 3.在戒毒方面的应用 Landry等人用可卡因水解的过渡态类似物-磷酸单酯为半抗原，产生的单克隆抗体能催化可卡因的分解，其催化活性和血液中催化可卡因的丁酰胆碱酯酶差不多，水解后的可卡因片断失去可卡因刺激功能。 因此，用人工抗体酶的被动免疫也许能阻断可卡因上瘾，达到戒毒目的 。 抗体酶的应用