流式细胞术分析黄连素HepG2细胞细胞周期的影响毕业论文.docx

毕业论文题目：流式细胞术分析黄连素对HepG2细胞细胞周期的影响学院：生命科学学院专业：生物技术毕业年限： 2012 年学生姓名：学号： 200874020129 指导教师：流式细胞术分析黄连素对HepG2细胞细胞周期的影响 摘要：目的 研究黄连素对HepG2肝癌细胞细胞周期的影响。方法 用PI对黄连素处理的肝癌细胞HepG2进行染色，用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 黄连素作用于HepG2细胞时，可将细胞周期阻滞在G2/M期，并且有“亚G1期”细胞的出现；抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cystein，NAC）降低了黄连素诱导HepG2细胞的凋亡率。结论 黄连素可以诱导HepG2细胞发生凋亡,较高浓度的黄连素可以将HepG2细胞细胞周期阻滞在G2/M期，NAC可以降低黄连素诱导的细胞凋亡率，黄连素对细胞的毒性作用可能是通过氧化胁迫引起的。关键词：流式细胞术；HepG2细胞；黄连素；细胞周期；细胞凋亡A flow cytometry study of The effect of berberine on cell cyclein HepG2 cellAbstract：objectiveTo study the effected of berberine on cell cycle.Methods PI was used to dye the hepatocarcinoma cell disposed by berberine. The change of cell cycle were detected by flow cytometry.results As disposedbyberberine,the cell cycle were arrested in G2/M.There is an apoptoticpeakappeared.N-acetyl-L-cystein reduce the apoptosis of HepG2 induced by berberine. Conclusion Berberine can inhibit proliferation of HepG2 by arresting cell in G2/M and inducing apoptosis .NAC could reduce the rate of cell apoptosis induced by berberine.The toxic effects on cells of berberine may be caused by the stress of oxidation. Key words:Flow cytometry; HepG2 cell; Berberine; Cell cycle ;Cell apoptosis 肝癌是一种世界上最常见的恶性肿瘤之一，在我国占居民恶性肿瘤死亡的第二位。全世界每年新发肝癌约26万例，占全部恶性肿瘤的4.0％，而42.5％的肝癌分布在中国，中国肝癌死亡率为20.4/10万，占全部恶性肿瘤死亡的18.8％[1]。由于肝癌起病比较隐匿，一经确诊往往已属晚期，故只能进行姑息性切除或放、化疗。疗效也不理想。因此，临床上肝癌病人急需特异性的、有效的新型抗癌方法。肿瘤发生的原因是相当复杂的，其中一个重要原因可能是细胞凋亡的趋势减弱[2]。因些，促进肿瘤细胞凋亡，纠正失衡的机体内环境，是抗肿瘤的一个重要方法。然而，细胞的凋亡受到很多种蛋白质分子调控，这些蛋白质大致可分为促凋亡和凋亡抑制两种蛋白。人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的。有关细胞死亡过程的研究，近年来已成为生物学、医学研究的一个热点。细胞的死亡至少有两种方式，即细胞坏死与细胞凋亡。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式，而细胞凋亡则是近年逐渐被认识的一种细胞死亡方式。细胞凋亡是细胞的一种基本生物象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有复杂的分子生物学机制以及重要的生物学意义。1965年澳大利亚科学家发现，结扎鼠门静脉后，电镜观察到肝实质组织中有一些散在的死亡细胞，它们的溶酶体并未被破坏，显然不同于细胞坏死。这些细胞体积收缩、染色质凝集、从其周围的组织中脱落并被吞噬细胞吞噬，机体无炎症反应。1972年Kerr等三位科学家首次提出了细胞凋亡的概念，宣告了对细胞凋亡的真正探索的开始。在此之前，关于胚胎发育生物学、免疫系统的研究，肝细胞死亡的研究都为这一概念的提出奠定了基础。形态学观察发现细胞凋亡的变化是多阶段的