现代生物技术02植物基因工程PPT.ppt

第三章1 植物基因工程 概况 ： 1、植物的遗传学特性 2、植物转基因的克隆与分离 3、植物转基因研究常用的基因类型 4、植物基因转移的载体：病毒和质粒 5、培养转基因植物的方法 6、利用转基因技术研究基因的表达与调控 7、利用转基因植物生产外源蛋白 8、转基因植物的研究成果与安全性评价 两个封面的故事 1）今年4月中国科学家完成了全世界第一张籼稻基因组草图。 2）11月份，中国科学家又宣布完成水稻基因组第4号染色体的精确测序。 这两项重大成果，吸引国际顶尖学术杂志《科学》和《自然》均用上封面及“主打叙述”的形式予以强势报导。 里程杯的诞生 1）中国早在1992年，启动了中国籼稻为水稻基因组研究品种； 2）1996年率先在世界上完成水稻基因组物理图； 3）1998年承担第4号染色体精确测序任务（国际水稻基因组计化）； 4）2002年4月，完成世界第一张籼稻全基因组框架序列图； 5）11月完成98年承担任务。 系列成果 1.测定3500万个碱基对，覆盖第4号染色体98％区域，精确率高达 99.99％； 2.鉴定出4658个基因，并注释在染色体准确位置上； 3.首次完整测定出决定高等植物乃至高等生物染色体稳定性的着丝粒 序列，为研究其功能提供结构基础； 4.发现并鉴定了一些重复序列在染色体上的特异分布规律以及与基因 的位置关系； 5.鉴定了4号染色体上基因簇分布，预测了基因之间潜在的协同关系； 6.与籼稻广陆矮四号染色体230万个DNA碱基对进行了相应序列的同 源比较，报道了水稻2个主要亚种间基因组成、顺序及DNA序列水 平异同，发现籼稻基因组大于梗米可能从籼稻中进化而来。 科技部决定整合精兵投资两亿元 我国水稻研究整体水平已达国际领先，国家科 技部决定，将水稻功能基因组研究作为“十五”科研前沿项目，投资2亿元，整合全国优势兵力，重点开展水稻功能基因组研究，全力在水稻遗传密码破解上获取更多自主知识产权。 植物的遗传学特征 1、具有自我受精的遗传特性； 2、基因的突变或重组、缺失，遗传后果易于观察到； 3、植物受到机械损伤后，易在伤口处长出愈伤组织的软组织； 4、植物细胞以纤维素组成细胞壁，通常不能直接吸收外源DNA，用纤维素酶处理植物细胞，制备原生质体即可吸收外源DNA分子； 5、植物染色体以多倍体形式存在，并导致体细胞变异频率高。 植物基因工程的主要内容 1、从种类繁多的植物群体中分离有用的目的基因； 2、寻找或构建有价值的克隆载体； 3、将重组载体通过体外转化等方法导入植物受体细胞，并整合到寄宿染色体基因组上； 4、使获得带有外源基因的重组载体 DNA的植物细胞或组织，再生成形态正常的健康能育的植株； 5、通过植物的有性过程，将良好的外源基因持续传递给后代。 第二节 植物基因的克隆与分离 一、根据基因的功能分离目的基因 二、根据mRNA特异性分离目的基因 三、根据DNA的插入作用分离目的基因 1）DNA标签法： 人为的给目的基因加上一段已知的序列标签。等于 DNA分子探针； 2）T－DNA标签法： 它是高等植物中一种非常有效的插入诱变剂和基因的标签。 第三节 植物基因工程研究常见的基因 1、选择标记基因 2、报告基因 3、抗虫抗病基因 4、非生物胁迫抗性基因 5、产物质量修饰基因 6、其他性状基因 第四节 植物基因转移的载体 一、病毒载体 1）单链RNA病毒 2）双链DNA植物病毒 3）单链的DNA病毒 二、质粒载体 1）病源土壤杆菌 2）植物冠婴病的诱发与细胞突增 3）Ti质粒的一次遗传特性 4）T-DNA的结构与功能 5）应用Ti质粒载体转移外源基因与生产转移基因植物 病毒载体的优点 1）植物病毒对宿体的感染是系列的，它能将基因组扩散到被感染植株的所有细胞； 2）可以解决象玉米这样单子叶植物的外源基因的导入问题； 3）重组病毒利用植物来生产大量外源蛋白。 病毒载体 1）单链RNA病毒：90％具有感染力的正链RNA（mRNA)； 2）双链DNA病毒：花椰菜花病毒组是唯一的一群以双链DNA作为遗传物质的病毒，寄主范围狭窄； 3）单链DNA病毒：在同一个蛋白质外壳内存在两条各长2.5Kb的单链DNA,单链A编码病毒外壳蛋白与复制有关的蛋白质，单链B则编码控制病毒从一个细胞转移到另一个细胞的运动蛋白。 二、质粒载体 1）病源土壤杆菌 2）植物冠婴病的诱发与细胞突增 3）Ti质