生物化学第14章翻译PPT.ppt

蛋白质的生物合成（翻译）Protein Biosynthesis，Translation;蛋白质的生物合成，即翻译，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。;解决以下的几个问题：;蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System ;合成原料：20种有遗传密码的氨基酸;一、翻译模板mRNA及遗传密码;原核生物的多顺反子; mRNA上存在遗传密码;遗传密码表;从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ;遗传密码的特点;2. 连续性(commaless);基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失，可能导致框移突变(frameshift mutation)。 ;3. 简并性(degeneracy);3. 简并性(degeneracy);4. 通用性(universal);5. 摆动性(wobble);U;密码子、反密码子配对的摆动现象;二、核蛋白体是多肽链合成的装置; 组成、结构与功能特点：;;原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:;三、tRNA是蛋白质合成的搬运工具; tRNA的功能：;氨基酸 + tRNA;第一步反应：酶找相应的氨基酸 ;第二步反应：酶找相应的tRNA;氨基酰tRNA合成酶有20种，分别特异性识别相应的20种氨基酸和相应的tRNA.。 ;氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet;真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet;大肠杆菌起始密码子编码的met须甲酰化;蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis ;翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination );一、肽链合成起始;原核生物各种起始因子(IF)的生物功能： ;eIF-2：促进起始Met-tRNAiMet与40S小亚基结合 eIF-2B：鸟苷酸交换因子（GEF），将eIF-2上的GDP交换成GTP eIF-3：最先与40S小亚基结合，促进大小亚基分离 eIF-4A：eIF-4F复合物成分，有解旋酶活性，有利用mRNA扫描 eIF-4B：结合mRNA，促进mRNA扫描定位起始AUG eIF-4E：eIF-4F复合物成分，结合mRNA的5′端帽子结构 eIF-4G：eIF-4F复合物成分，连接eIF-4E、eIF-3和PABP等组分 eIF-5：水解GTP， 促进各种起始因子从核糖体释放，进而结合大亚基 eIF -6：促进核蛋白体分???成大小亚基;（一）原核生物翻译起始复合物形成;IF-3;A;S-D序列 ;IF-3;IF-3;（二）真核生物翻译起始复合物形成;met;起始因子IF和eIF（eukaryotic IF）; 真核生物与原核生物翻译起始的不同点：;二、肽链合成延长;每次循环包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation);延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2;原核延长因子;又称注册(registration);延长因子EF-T催化进位（原核生物） ;;Tu;（二）成肽;;（三）转位;;fMet;进位;;真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。; 三、肽链合成的终止;RF-3：具有GTP酶活性，可结合并水解 1分子GTP，促进RF-1或RF-2与 核蛋白体结合。;U;多聚核蛋白体(polysome);蛋白质合成能量消耗情况;蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation;主要包括:;一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质;几种有促进蛋白折叠功能的大分子;1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GrpE族 2. 伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族;热休克蛋白