研究生-组织化学概论2PPT.ppt

染色流程 　　(1)二甲苯（Ⅰ） 10min 　　(2) 二甲苯（Ⅱ） 10 min 　　(3)100%乙醇（Ⅰ） 1min 　　(4)100%乙醇（Ⅱ） 1min 　　(5)80%乙醇 2min 　　(6)蒸馏水 1-2min 　　(7)苏木精液染色 5 min 　　(8 ) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s 　　(9) 1%盐酸乙醇 1-3 s 　　　 　(11)流水冲洗10min 　　(12) 0.5%伊红液染色 1-3 min 　　(13) 蒸馏水稍洗 1-2 s 　　(14) 80%乙醇稍洗 1min 　　(15) 95%乙醇（Ⅰ） 1min 　　(16) 95%乙醇（Ⅱ） 1min 　　(17) 无水乙醇 1min 　　(18) 无水乙醇 1min 　　(19) 二甲苯（Ⅰ） 1min 　　(20) 二甲苯（Ⅱ） 1min 　　(21) 二甲苯（Ⅲ） 1 min 　　(22) 中性树胶封固 　 冷冻切片HE染色步骤： 　　（1）冰冻切片固定 10～30 s 　　（2）稍水洗 1～2 s 　　（3）苏木精液染色（60℃） 3min 　　（4）流水洗去苏木精液 5～10 s 　　（5）1%盐酸乙醇 1～3 s 　　（6）稍水洗 1～2 s 　　（7）促蓝液返蓝 5～10 s 　　（8）流水冲洗 15～30 s 　　（9）0.5%曙红液染色 30s 　　（10）蒸馏水稍洗 1～2 s 　　（11）80%乙醇 10 s 　　（12）95%乙醇 10 s 　　（13）无水乙醇 10 s 　　（14）无水乙醇10 s 　　（15）二甲苯（Ⅰ） 10 s 　　（16）二甲苯（Ⅱ） 10 s 　　（17）中性树胶封固。 染色结果：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色 注意事项： 1.脱蜡 2.烤片温度和时间 3.染色时间，根据试剂新鲜程度 4.盐酸乙醇分化必须控制时间，分化可以选择温水 5.脱水必须充分 6.透明必须充分，封片尽量湿封 常用的特殊染色 一、特殊染色的意义 1.显示HE染色切片中看不到的目的物 2.区别HE染色切片中一些难以鉴别的病变 3.使HE染色切片中不明显或容易被忽略的 目的物变得明显易见 二、特殊染色的分类 结缔组织、肌肉组织、神经组织、脂类物质、糖类、色素类、病理的内源性沉着物、病原微生物、内分泌、单种细胞、性染色质、骨、血液、造血组织、核酸、酶类等 三、特殊染色的命名 1、按发明者的姓名命名 2、按所用染色剂命名 3、按显示的目的物命名 4、采用混合性命名 四、学习特染技术应掌握的重点 （注意事项）（1）染色方法的成败，应该在温度、浓度、时间和PH值等方面找原因。（2）注意特染的应用范围，如某种病变应用什么方法染色才能达到目的，一般先在HE切片所见的要求去选择适当的特染方法，一种或多种。 （3）必须掌握各种特殊染色的结果，避免导致错误的结论或严重的误诊，如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。（4）尽量要阳性切片作对照，便于选择特染方法，并与HE切片作对照。（5）特染的组织，在其固定、脱水根据要求选择。所用的器皿都必须化学清洗。 三、玻璃器皿的清洁 在病理实验室可用的玻璃器皿，都必须经过清洗干净才能使用，清洗的方法依玻璃器皿的新旧而不同。 1、新购玻璃器皿的处理 对于新购买的玻璃器皿应先用洗衣粉浸泡洗刷，自来水冲洗后再用1—2%盐酸水溶液浸泡数小时后，用自来水冲洗干净，必要时可用少量蒸馏水洗2次。 2、使用后玻璃器皿的处理 每次使用后的玻璃器皿都必须及时彻底清洗干净，以供下次实验之用，如轻视这一步骤，可用的玻璃器皿不够干净，则会影响染色效果，甚至导致染色失败，特别在酶组化和银离子反应操作过程中更有严格的要求，使用后的玻璃器皿在一般清洗后，还要求用硫酸清洗液浸泡。 硫酸清洗液配制重铬酸钾 80g自来水 1000ml浓硫酸（工业用） 120m新配制的清洁液为红褐色，反复使用一段时间后，慢慢变成绿色，说明清洁液已失败，不能继续使用应重新配制。 3、玻璃器皿的清洗方法 ① 任何玻璃器皿都必须用自来水冲洗，然后把残余药液或染液洗去。② 用毛刷沾洗衣粉擦干净。③ 自来水冲洗，蒸馏水洗2次。④ 把晾干的器皿轻轻置入清洁液浸泡数日。⑤ 取出器皿，用自来水把器皿内外彻底冲洗干净，最后用蒸馏水洗2次。⑥ 把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或温箱中烤干，最后存放橱内备用。 糖类 单糖 糖类 双糖 淀粉