第 15 章 蛋白质的生物合成PPT.ppt

一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 几种有促进蛋白折叠功能的大分子 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isome rase, PPI) 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) 整个翻译过程可分为 ： 翻译过程从阅读框架的5′-AUG开始，按mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链，直至终止密码出现。 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 原核、真核生物各种起始因子的生物功能 （一）原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。 IF-3 IF-1 1. 核蛋白体大小亚基分离 A U G 5 3 IF-3 IF-1 2. mRNA在小亚基定位结合 S-D序列 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3. 起始氨基酰tRNA ( fMet-tRNAimet ) 结合到小亚基 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4. 核蛋白体大亚基结合，起始复合物形成 A U G 5 3 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi （二）真核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； 起始氨基酰-tRNA结合； mRNA在核蛋白体小亚基就位； 核蛋白体大亚基结合。 met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 二、肽链合成延长 指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts)、EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位， 结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EFG 有转位酶活性，促进mRNA- 肽酰-tRNA由A位前移到P位， 促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 （一）进位 又称注册(registration) 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。 延长因子EF-T催化进位（原核生物） Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP （二）成肽 是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 进位 转位 成肽 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 （四）真核生物延长过程 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成